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近代生物学研究技术 陈大松 讲授的部分： 细菌质粒的接合转移 细菌大质粒的快速检测 电脉冲技术在细菌质粒转化中的应用 第一讲 细菌质粒的接合转移 一、细菌基因重组的主要方式： 转化（transformation） 转导（transduction） 转移（transfer） 二、质粒的转移性 F质粒的结合转移（conjugal transfer） 按能否自主转移，将天然存在的质粒分为两大类 1．转移型质粒： 大肠杆菌：F因子、R1、R100、R6K、RP4…… 天蓝色链霉菌：致育性因子pSCP1、pSCP2…… 2．非转移型： 大肠杆菌的ColE1、RSF1010等。 三、实验室条件下的接合转移 IncP不相容群质粒 : 多数革兰氏阴性 细菌之间： G - G - 来自Pseudomonas aeraginosa 的 RP4 自我转移 诱动转移 1．质粒转移体系的构建： 1983年 R.Simon RP4的衍生质粒 E.coli E.coli S17-1 (有诱动能力) Mob片段 pK18 pK18:Mob (能被RP4识