色谱的应用技术.ppt

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HPLC应用与操作技术 中明善大学。。 HPLC方法建立的步骤 样品的性质和分离目的 样品前处理方法的选择 检测器的选择 选择、优化色谱分离条件 纯化物质十[定量分析匚定性分析 [方法学确证 中明等种大学 PLc条件的选择 一般样品:等度洗脱、梯度洗脱、离子抑制、离 子对、正相、衍生化 无机离子:检测成问题,离子色谱、电导检测器 对映异构体:手性高效液相色谱 生物大分子:色谱柱孔径较大(大于10nm) 中明等种大学 《 Practical HPLC Method Development》 L R Snyder, J. Kirkland 《实用高效液相色谱方法建立》 下载网址 cn/bbs/shtml/200804 26/1236422/ 中明等种大学 药物衍生化的目的 减小前处理难度或增加稳定性; 改善色谱分离 提高检测性能; 中明等种大学 衍生化方式 特点限制 柱前衍生化改善色谱分 复杂样品衍生 化难度大。 有利于复杂样不改善色谱分 柱后衍生化品的生化分离,反而可能 析 造成峰展宽。 中明等种大学 荧光衍生化反应 H2C、CH 取代基 荧光团 SO2NHNH 反应基团 衍生化试剂的基本结构示意图 中种大 胺类和氨基酸的荧光衍生化试剂 含有羰基的试剂 CHO S-R RNH CHO RSH 邻苯二甲醛(OPA) 激发波长:340nm发射波长:455mm 特点:本身无荧光,产物有荧光;反应迅 速,适合柱后衍生化。 中明等种大学

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