载体教案资料.ppt

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载体;载体的功能及特征;按克隆载体的来源分: 质粒~ 病毒或噬菌体~ 质粒与病毒或噬菌体DNA组成的~ 质粒与染色体DNA片段组成的~;质粒;质粒;构型:;质粒; cop基因:指令宿主合成阻遏物,当质粒复制到一定拷贝数时,阻遏物也合成积累,直到阻止质粒的继续复制。;rep基因:指令宿主合成一种调节蛋白,促进质粒的复制;控制复制起始因子与复制起始位点(ori)的结合;质粒;质粒;质粒;质粒;质粒载体的命名;(1)分子量大,拷贝数低;;ColE1质粒的筛选标志是大肠杆菌素E1(colicin E1)。;(1) 具有复制起点(ORI);;构建质粒载体的指导思想;氨苄青霉素抗性(Ampr) 卡那霉素抗性 (Kanr) 四环素抗性 (Tetr) 链霉素抗性 (Strr) 氯霉素抗性 (Cmlr);② 遗传标记;质粒;质粒;pSP2124质粒的Ampr基因;;质粒;质粒;质粒;TA克隆载体——针对PCR产物的克隆 原理 PCR产物在Taq酶的非模板依赖活性 作用下,于3`端加一非配对的A。 故可研制一种线性载体,其5`端各带一不配对T,可直接与PCR产物以TA连接进行克隆,即TA克隆。 TA载体的再生方法 (1)克隆载体线性化 (2)克隆载体末端补平反应 (3)克隆载体末端加T反应 注:再生后的TA载体,原线性化的酶切位点消失;质粒;噬菌体或病毒DNA;噬菌体或病毒DNA;l 噬菌体生物学特性: 生物结构;噬菌体或病毒DNA;;噬菌体或病毒DNA;噬菌体或病毒DNA;噬菌体或病毒DNA;噬菌体或病毒DNA;噬菌体或病毒DNA;噬菌体或病毒DNA;噬菌体或病毒DNA;噬菌体或病毒DNA;噬菌体或病毒DNA;噬菌体或病毒DNA;噬菌体或病毒DNA;噬菌体或病毒DNA;噬菌体或病毒DNA;噬菌体或病毒DNA;噬菌体或病毒DNA;噬菌体或病毒DNA;噬菌体或病毒DNA;噬菌体或病毒DNA;考斯质粒与噬菌粒;考斯质粒与噬菌粒;考斯质粒与噬菌粒;考斯质粒与噬菌粒;考斯质粒与噬菌粒;考斯质粒与噬菌粒;人造染色体载体;;此课件下载可自行编辑修改,仅供参考! 感谢您的支持,我们努力做得更好!谢谢

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