- 1、本文档共64页,可阅读全部内容。
- 2、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
查看更多
载体;载体的功能及特征;按克隆载体的来源分:
质粒~
病毒或噬菌体~
质粒与病毒或噬菌体DNA组成的~
质粒与染色体DNA片段组成的~;质粒;质粒;构型:;质粒;
cop基因:指令宿主合成阻遏物,当质粒复制到一定拷贝数时,阻遏物也合成积累,直到阻止质粒的继续复制。;rep基因:指令宿主合成一种调节蛋白,促进质粒的复制;控制复制起始因子与复制起始位点(ori)的结合;质粒;质粒;质粒;质粒;质粒载体的命名;(1)分子量大,拷贝数低;;ColE1质粒的筛选标志是大肠杆菌素E1(colicin E1)。;(1) 具有复制起点(ORI);;构建质粒载体的指导思想;氨苄青霉素抗性(Ampr)
卡那霉素抗性 (Kanr)
四环素抗性 (Tetr)
链霉素抗性 (Strr)
氯霉素抗性 (Cmlr);② 遗传标记;质粒;质粒;pSP2124质粒的Ampr基因;;质粒;质粒;质粒;TA克隆载体——针对PCR产物的克隆
原理
PCR产物在Taq酶的非模板依赖活性
作用下,于3`端加一非配对的A。
故可研制一种线性载体,其5`端各带一不配对T,可直接与PCR产物以TA连接进行克隆,即TA克隆。
TA载体的再生方法
(1)克隆载体线性化
(2)克隆载体末端补平反应
(3)克隆载体末端加T反应
注:再生后的TA载体,原线性化的酶切位点消失;质粒;噬菌体或病毒DNA;噬菌体或病毒DNA;l 噬菌体生物学特性: 生物结构;噬菌体或病毒DNA;;噬菌体或病毒DNA;噬菌体或病毒DNA;噬菌体或病毒DNA;噬菌体或病毒DNA;噬菌体或病毒DNA;噬菌体或病毒DNA;噬菌体或病毒DNA;噬菌体或病毒DNA;噬菌体或病毒DNA;噬菌体或病毒DNA;噬菌体或病毒DNA;噬菌体或病毒DNA;噬菌体或病毒DNA;噬菌体或病毒DNA;噬菌体或病毒DNA;噬菌体或病毒DNA;噬菌体或病毒DNA;噬菌体或病毒DNA;考斯质粒与噬菌粒;考斯质粒与噬菌粒;考斯质粒与噬菌粒;考斯质粒与噬菌粒;考斯质粒与噬菌粒;考斯质粒与噬菌粒;人造染色体载体;;此课件下载可自行编辑修改,仅供参考!感谢您的支持,我们努力做得更好!谢谢
文档评论(0)