研究生分子生物学实验I讲义-2017.docVIP

PAGE PAGE 3 《分子生物学实验技术I》 实验讲义 （适用于生命科学类相关专业研究生） 实验一、目的基因的获得 实验二、质粒DNA的提取 实验三、载体和目的片段的酶切 实验四、DNA重组技术 实验五、大肠杆菌感受态的制备及其转化 实验六、阳性克隆的筛选与鉴定 研究生《分子生物学实验技术I》准备与安排 一、试剂（每班用量，按照每班30人计算） 提前配制的试剂：需要在预备实验阶段配置完成。 其余试剂由学生在课堂上自己配制，并高压灭菌。仅供本班使用。 1．1mol/L Tris.HCl：pH值8.0, 100mL 教师配制 （每班约需1mL） Tris12.14g溶于80mL ddH2O中，HCL调至pH值8.0，定容至100mL，高压灭菌. 2. 0.5mol/L EDTA：pH值8.0, 100mL 教师配制（每班约需1mL） 18.61g溶于80mL ddH2O中，NaOH调pH值8.0, 定容至100mL，高压灭菌. 3. 溶液Ⅰ（10 mL）：使用1mol/L Tris和0.5mol/L EDTA母液配制 50 mmol/L葡萄糖；25 mmol/L Tris-HCl(pH 8.0)；10 mmol/L EDTA。Na2（pH 8.0） 4. 溶液