实验四-氨基酸的纸层析法.pdfVIP

中国海洋大学试验报告 2013 年 11 月 13 日 姓名 ：郭沈杰 年级专业 ：2012 级生物科学 同组者：蔡萍萍 学号：12050011012 实验四 氨基酸的纸层析法 一、实验目的 了解并掌握氨基酸纸层析法的原理和方法。 二、实验原理 以滤纸为支持物的层析法，称为纸层析法。纸层析所用展层剂大多由水和有机溶剂组成。 展层时，水为固定相，它与滤纸纤维亲和力强；有机溶剂为流动相，它与滤纸纤维亲和力弱。 有机溶剂在滤纸上又下向上移动的，称为上行法；有上向下移动的，称为下行法。 将样品在滤纸上确定的原点处展层，由于样品中各种氨基酸在两相中不断进行分配，且 他们的分离系数各不相同，所以不同的氨基酸随流动相移动的速率也不相同，于是各种氨基 酸在滤纸上就相互分离出来，形成距原点不等的层析点。 在一定条件下（室温、展层剂的组成、滤纸的质量、PH 值等不变），不同的氨基酸有 固定的移动速率（R 值） f R =原点到层析点中心的距离/原点到溶剂前沿的距离 f 混合氨基酸做样品时，如果只用一种溶剂展层，由于某些氨基酸的移动速率相同或相近， 就不能