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第七章高效液相色谱分析法
高效液相色谱仪
主要分离类型
液相色谱固定相与流动相
影响分离的因素与分离类型的选择
高效液相色谱法( high performance liquid
chromatography, HPLC):
是20世纪60年代末继气相色谱法后迅速发展起
来的现代液相色谱法。
高效液相色谱仪:
岛津高效液相色谱仪LC-10A系列
HP1050系列液相色谱仪
tLIT
aters LO-6〔
高效液相色谱法的特点
(1)高效
柱效可达每米105理论塔板数
(2)高速
几分钟或几十分钟内完成
(3)高灵敏度
检测限可达109至101lg
(4)自动化程度高
大多数HPLC仪配备计算机,特别是色谱专家系
统的使用,实现了高效液相色谱仪的自动化。
(5)应用范围广
沸点高、相对分子质量大、热稳定性差的有机物
都可采用HPLC分析。约75%-80%的有机物。
第一节高效液相色谱仪
高效液相色谱仪一般由四大部分组成
高压输液系统
进样系统
进样器
分离系统
检测系统
贮
信号
废被
、高压输液系统
高压输液系统由贮液罐、高压输液泵、过滤器、
梯度洗脱装置和压力脉动阻滞器等组成。
1、高压输液泵( high pressure pump):核心部件
作用是将流动相在高压下连续不断地送入液路系统,
保证流动相正常工作。
配动相出口
单向個
(动画)
2、梯度洗脱装置:
将两种或两种以上性质不同但能互溶的溶剂,
按一定程序连续改变其配比,以改变流动相的极
性、离子强度和溶液的PH值等,从而改变被测组
分的相对保留值,提高分离效率,缩短分析时间。
类似气相色谱的程序升温。
(1)低压梯度装置:在常压下将不同溶剂按一定
配比混合,然后借助一台高压泵,将混合好的流
动相压入色谱柱中。
(2)高压梯度装置:采用多元高压泵,将不同溶
剂按一定配比吸入混合室,在高压下进行混合
然后进入色谱柱,程序控制每台泵的输出量。
溶剂A
比例阀(溶剂混合点)
溶剂A(泵A
混合器
混合器
溶剂B
(溶剂混合点)
溶剂B(泵B
泵
高压梯度
低压梯度
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