临床基础检验学：实验三 白细胞计数 嗜酸性粒细胞计数.pptVIP

计数原则： 遵循一定方向，压线细胞数上不数下、数左不数右 报告方式：X.XX × 109/L 计算公式： 计数：N为2个计数池10个大方格内E的总数 参考区间（0.05～0.50）× 109/L 注意事项： 标本：采集时间最好固定 立即混匀，振荡不宜太猛烈，以免细胞破坏 计数误差：同白细胞计数 计数时间：60分钟内完成，细胞破坏，结果偏低 与中性粒细胞区别（N着色浅/不着色，颗粒小） 保护剂的用量 作业： 1、白细胞计数与嗜酸性粒细胞计数有哪些相同和不同之处？ 2、某血液标本手工计数白细胞为12.0x109/L，在 进行白细胞分类计数时，分类计数100个白细胞 过程中见到有核红细胞20个，该标本的白细胞 应该如何处理？ 襄樊职业技术学院 襄樊职业技术学院 襄樊职业技术学院 学习目标 襄樊职业技术学院 襄樊职业技术学院 参考文献 襄樊职业技术学院 襄樊职业技术学院欢迎您！ 实验三、白细胞计数 嗜酸性粒细胞计数 手工WBC计数原理： 白细胞稀释液（冰乙酸）将血液稀释一定倍数，同时破 坏红细胞和固定白细胞，充入血细胞计数池，在低倍镜下计数 一定区域内的白细胞数量，换算出每升血液中白细胞总数。 器材： 一次性消毒采血针、微量吸管、试管、5ml移液管、 75%乙醇棉球、干棉球、显微镜、Neubaue计数板、盖玻片、玻 璃棒等。 试剂：白细胞稀释液（2%冰乙酸、结晶紫） 标本：EDTA-K2抗凝静脉血或末梢血 显微镜白细胞计数： 0.38ml稀释液 20ul全血 稀释/混匀，待悬液变为棕褐色 充池， 静置2-3min 低倍镜，计数四角4个大方格WBC总数 上清洗2-3次 摇匀，一次完成，不能满溢/不足、不能有气泡，静置2-3min 切记：充池后只能缓慢平移计数板 充池 湿润支持柱，“推式”的方法加上盖玻片 低倍镜，暗视野，聚光器最下，光圈调到最小，调光源 R R R R R W W W W 计数原则： 遵循一定方向，压线细胞数上不数下、数左不数右 报告方式：X.XX×109/L 计数：N为四角4个大方格内WBC的总数 计算公式： 参考值 ： 成人：（4～10）?109/L， 儿童：（5 ～12） ?109/L 6月～2岁：（11～12）?109/L 新生儿：（15～20）?109/L， 注意事项： 采血应顺利，稀释倍数要准确 稀释液新鲜、小试管和计数板均清洁干燥 计数规则：数上不数下、数左不数右 充池：分布均匀，大格间WBC数差异8个，2次计数10% 减少技术域误差：WBC数量过多、过少时的处理； 有核红细胞的处理（分类100个WBC遇见的有核红细胞数） 嗜酸性粒细胞直接计数 嗜酸性粒细胞直接计数原理： 用嗜酸性粒细胞稀释液，将血液稀释一定倍数，使红细胞和其他白细胞破坏，并使嗜酸性粒细胞着色。将稀释的细胞悬液滴入血细胞计数板，计数一定体积内的嗜酸性粒细胞数量，经换算得出每升血液中的嗜酸性粒细胞数。 稀释 计数一定区域内Eos数 换算成每升血液Eos数 器材： 0.5ml移液管、改良牛鲍氏计数板、盖玻片 微量吸管、试管、玻璃棒，显微镜等 试剂 伊红-丙酮稀释液 Hinkelman稀释液 乙醇-伊红稀释液 皂素-甘油稀释液 溴甲酚紫稀释液 固绿（FCF）稀释液 破坏RBC/WBC 对E保护 使E着色 乙醇 乙二醇 丙酮 标本：EDTA-K2抗凝静脉血或末梢血 20g/L伊红水溶液——细胞颗粒着色 丙酮——嗜酸性粒细胞保护剂 蒸馏水——低渗，坏红细胞和其他白细胞 伊红-丙酮稀释液 20g/L伊红水溶液 5ml 丙酮 5ml D.W.90ml 显微镜E直接计数 0.38ml E稀释液 20ul全血 稀释/轻柔混匀，RBC溶解 充池(2个)， 静置3-5min 低倍镜，计数10个大方格E总数 上清洗2-3次 显微镜白细胞计数： 0.38ml 稀释液 20ul全血 稀释/混匀，待悬液变为棕褐色 充池， 静置2-3min 低倍镜，计数四角4个大方格WBC总数 上清洗2-3次 摇匀，一次完成，不能满溢/不足、不能有气泡，静置2-3min 切记：充池后只能缓慢平移计数板 充池 湿润支持柱，“推式”的方法加上盖玻片 低倍镜，暗视野，聚光器最下，光圈调到最小，调光源 第一眼：嗜酸性颗粒（橘红色） 襄樊职业技术学院 襄樊职业技术学院 襄樊职业技术学院 学习目标 襄樊职业技术学院 襄樊职业技术学院 参考文献 襄樊职业技术学院 襄樊职业技术学院欢迎您！