临床免疫学：第七章 免疫比浊技术.pptVIP

二、纳米微球的致敏 粒径小的胶乳微球，所需抗体量较多，精密度和线性相对较好； 粒径大的胶乳微球，所需抗体量较少，精密度和线性相对较差，但灵敏度较好； 二、纳米微球的致敏 纳米微球的制备： 物理吸附法 共价偶联法 亲和素-生物素桥联法 直接结合法 多肽桥连接法 二、纳米微球的致敏 一、物理吸附法 表面修饰有磺酸基、羧基、醛基的微球可以直接和蛋白质上的疏水基团配位结合，将二者混合反应后，再除去未结合的游离抗体即可获得胶乳-抗体复合物。 缺点：活性降低、甚至失活 二、共价偶联法 通过一定的活化剂将具有不同表面基团的微球与抗原/抗体表面的相应基团偶联； 比物理吸附法稳定，能最大程度保持抗原、抗体的三维空间结构并有效保护抗原抗体的活性位点。 三、分析条件的优化 1、抗原、抗体的比例 在抗体水平恒定的条件下，抗原量和比浊检测信号之间的关系分为三个区； 抗体过剩，但必须适量 先确定被测物的正常值，以高于或低于此正常值的50%作为测定范围，抗体在此范围内均应保持过量； 自动检测功能，并能对含过量抗原的待测样品进行自动稀释、重新检测。 三、分析条件的优化 2、抗原抗体反应的溶液 pH6.5 ～ 8.5有利于复合物形成； 离子强度大，复合物形成快； 缓冲液种类影响复合物的形成，常用磷酸盐缓冲液； 3、增浊剂的作用 常用聚