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- 2020-12-08 发布于广东
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固态发酵漆酶活性测定:
酶液制取:5g 发酵样品以 1:20(W/V)比例用蒸馏水悬浮,200 r/min 摇 3h,之
后 5000 r/min 离心 20min。(上清用 0.45μm 滤纸过滤,于-20℃保存滤液,取能 整除的滤液体积用于漆酶活性测定。)
酶活反应体系 3.0mL(2.3mL 0.2mol/L 醋酸-醋酸钠缓冲液;pH=4.5
0.5mL 粗酶液稀释液;0.2mL 1mmol/L 的 ABTS) 420nm 处测定吸光值的变化。
此实验固态发酵漆酶活性计算公式:;2;固态发酵锰过氧化物酶(MnP)活性测定:
酶液制取:粗酶液制备发酵过程中每隔 2 d 取 5 g 发酵物于 250 mL 三角 瓶中,加入 100 mL H2O,在 200 r / min 的摇床中振荡提取 3 h,之后 5000 r/min
离心 20min。(用滤纸过滤后,取滤液用于测定 MnP 酶活性。)
在 4 mL 反应体系中含 50 mmol/L( pH 4 ~5) 的乳酸钠缓冲液 3. 4 mL,1.
6 mmol/L 的硫酸锰溶液 0. 1 mL,酶液 0. 4 mL,预热至 37 ℃ 时,加 1. 6 mmol
/ L 的 H2O2 溶液 0. 1 mL 启动反应。在 238 nm 紫外光处,测定反应 4 min 内 OD238
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