2020第四章核酸电泳与检测.pptVIP

琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡过程中 DNA Ladder 的形成 PCR 产物的电泳 ? RNA 电泳图 4. 注意事项 ? 1 、溴乙锭 (EB) 是诱变剂 ，应戴乳胶手套。 凡是沾污过溴乙锭的器皿或物品 , 必须经专 门处理后，才能进行清洗或弃去。 ? 2 、加样量的多少决定于加样孔最大容积。 加入样品的体积应略少于加样孔容积。 ? ? 核酸凝胶电泳 ? 用于分离、鉴定和纯化 DNA 或 RNA 片段 ? 优点： ? 便于分离；便于检测；便于回收 1. 基本原理 ? 琼脂糖凝胶电泳是以琼脂凝胶作为支持物， 利用 DNA 分子在泳动时的电荷效应和分子 筛效应，达到分离混合物的目的。 (1) 电荷效应 在 pH 值为 8.0 ～ 8.3 时， DNA 分子在高于 其等电点的溶液中 , 核酸分子碱基几乎不解 离，磷酸全部解离，核酸分子带负电，在 电泳时向正极移动。 (2) 分子筛效应 在一定的电场强度下， DNA 分子的迁移速度 取决于分子本身的大小和构型。 分子量较小的 DNA 分子，比分子量较大的 DNA 分子迁移率要快； 同等分子量的不同构型的核酸分子， cccDNA ＞ IDNA ＞ ocDNA （ 3 ） DN