植物细胞膜透性的测定.docxVIP

PAGE PAGE # / 2 实验二——电导仪法 一、 原理： 植物细胞膜对维持细胞的微环境和正常的代谢起着重要的作用。在正常情 况下，细胞膜对物质具有选择透过性能力，当植物体受到逆境影响时，如高温 或低温，干旱、盐渍、病原菌侵染后，细胞膜遭到破坏，膜透性增大，从而使 细胞内的电解质外渗，以致植物细胞浸提液的电导率增大。膜透性增大的程度 与逆境胁迫强度有关，也与植物抗逆性的强弱有关。这样，比较不同作物或同 一作物不同品种在相同胁迫温度下膜透性的增大程度，即可比较作物间或品种 间的抗逆性强弱，因此，电导法目前已成为作物抗逆性栽培、育种上坚定植物 抗逆性强弱的一个精确而实用的方法。 二、 植物材料及仪器设备： 植物材料： 黄瓜叶片（完全培养下的黄瓜叶片和不同浓度铅溶液胁迫下的黄瓜叶片） 仪器设备： 冰箱、恒温箱、真空泵（附真空干燥器）1套、电导仪、恒温水浴箱、剪 刀、打孔器、镶子、试管架、具塞普通试管 5支、10ml移液管（或移液枪）、 玻璃棒、吸球、洗瓶、滤纸、保鲜膜等。 三、 实验步骤： 清洗用具： 实验所用的玻璃器皿用洗衣粉清洗 r白来水洗干净r去离子水润洗r倒置在 试管架上，备用。 将不同处理的黄瓜叶片分别用白来水洗干净并用去离子水润洗，再用洁净 滤纸吸干表面水分。用6~8min的打孔器避开主脉打取圆叶片（或切割成大小一 致的叶块），每组叶片打取30片小圆片，分装在2支洁净的试管中，每管放15 片。 在装有叶小圆片的试管加入15ml去离子水，用保鲜膜封口，并用解剖针 将保鲜膜扎几孔（以防止叶圆片在抽气时翻出试管）以便抽气。然后将试管放 入真空干燥箱中用真空泵抽气10min,以抽出细胞间隙的空气，然后缓缓打开 进气阀，空气重新进入干燥箱时水即被压入组织中而使叶片下沉（即水渗入细 胞间隙，叶片变成半透明状，沉入水下） 将以上试管置室温下30min,期间要多次摇动试管，促进水分交换。 5.30min后将各试管充分摇匀，用电导仪测其初电导值，同时测定去离子水 的电导值作为空白对照组。 6.测完初电导值后，将各试管放入 100 C沸水中10min,以杀死细胞组织， 取出试管后用白来水冷却至室温后，摇匀，测其终电导值。 四、 结果计算： 相对点导度=初电导值-空白电导值/终电导值-空白电导值 伤害率（%）=（逆境叶片的相对点导度-正常叶片的相对点导度）/ （1-正 常叶片的相对电导度）X 100 五、 注意事项： 所取的叶片xx要一致。 整个过程中，叶片接触的用具必须绝对洁净，也不要用手接触叶片，以免 污染。 抽气要使叶片下沉才能与水分充分进行交换。 CO卷水中的溶解度较高，测定电导时要防止 CO侦源和口中呼出CO进 入试管，以免影响结果的准确性 温度对溶液的电导影响很大，测定必须在相同温度下测定。