粪大肠菌群操作细则.docxVIP

粪大肠菌群 多管发酵法 1、培养基、试剂与仪器 本标准所用试剂除另有注明外， 均为符合国家标准的分析纯化学试剂； 实验 用水为新制备的去离子水。 单倍乳糖蛋白胨培养液： 称取 23.0g 乳糖蛋白胨营养液于 1L 蒸馏水中，加热煮沸至完全，分装于含 有倒置的小玻璃管的试管中，每试管约 8ml（先用移液管吸取 7ml 至试管中，再 用滴管吸取营养液放至小玻璃管中， 直至营养液溢出。 注意小玻璃管中不能有气 泡，若出现气泡，应将气泡排出后再注入营养液。），于高压蒸汽灭菌器中，在 115℃灭菌 20min，贮存于暗处备用。 EC 培养液： 称取 37.0gEC 肉汤于 1L 蒸馏水中，加热煮沸至完全，分装于含有倒置的小玻璃管的试管中，每管 8ml（操作方法同单倍乳糖蛋白胨营养液），于高压蒸汽灭菌器中，在 115℃灭菌 20min，贮存于暗处备用。 培养基的存放 在密封瓶中的脱水培养基成品要存放在大气湿度低、 温度低于 30℃的暗处，存放时应避免阳光直接照射， 并且要避免杂菌侵入和液体蒸发。 当培养液颜色变化，或体积变化明显时废弃不用。 验所需仪器 超净工作台、恒温培养箱、高压蒸汽灭菌器、冰箱、酒精灯、天平、电炉、 500ml 广口瓶、烧杯、玻璃棒、玻璃发酵管、试管架、移液管、移液枪、接种环 步骤 前期准备 器皿灭菌（高压蒸汽灭菌）：所用采集水样的广口瓶、玻璃试管、移液管、 玻璃棒、接种