高中生物2020名师指引与高考对接考点加强课6限制酶的选择与目的基因的检测与鉴定.pdfVIP

1.限制酶的选择原则 (1)根据目的基因两端的限制酶切点确定限制酶的种类 ①应选择切点位于目的基因两端的限制酶，以便将目的基因 “切出”，如图甲可选 择Pst Ⅰ。 ②不能选择切点位于目的基因内部的限制酶，以防破坏目的基因，如图甲不能选择 Sma Ⅰ。 ③为避免目的基因和质粒的自身环化和随意连接，也可使用不同的限制酶切割目的 基因和质粒，如图甲也可选择用Pst Ⅰ和EcoR Ⅰ两种限制酶(但要确保质粒上也有这 两种酶的切点，而且这种切点不致于完全破坏 “标记基因”) 。 (2)根据质粒的特点确定限制酶的种类 ①所选限制酶要与切割目的