杂交水稻参与杂草稻起源的证据及抗除草剂转基因水稻生态风险研究.docxVIP

杂交水稻参与杂草稻起源的证据及抗除草剂转基因水稻生态风 险研究 杂草稻是与栽培稻同种的杂草生物型 , 广布于世界各水稻产区 ,已经成为一 些热带国家和地区导致水稻减产的首要杂草因素。 杂草稻的发生和危害在近年来 有愈发严重的趋势 , 虽已经有众多杂草稻起源假说但尚无定论。 由于杂草稻和水稻对除草剂的反应一致 , 还没有对杂草稻有效但对栽培稻安 全的化学防除方法。 抗除草剂转基因水稻一度被认为是有效解决杂草稻防除难问 题的钥匙。 但对其商业化种植潜在的生态安全问题是我们必须进行防范的。首先 , 杂草 稻与转基因水稻之间的基因交流存在抗性基因逃逸的生态风险 , 由此产生的抗除 草剂杂草稻会具有更大的防除难度。 其次, 抗除草剂转基因水稻的商业化种植势必会加重对应用最为广泛的非选 择性除草剂草甘膦和草铵膦的依赖 , 继而出现对单一类型除草剂长期使用的情况。 稻田杂草群落结构会因此而发生改变 , 某些可以逃过除草剂伤害的杂草可能迅速 发展为优势群落。 抗/ 耐除草剂杂草问题也可能会因为在单一除草剂长期选择压下加重 ,从而 为稻田杂草的防除带来新难题。针对上述问题 , 本研究分别从杂草稻的起源、抗 除草剂基因的逃逸、长期单一除草剂的使用三个方面为切入点展开研究工作。 1. 栽培水稻来源是杂草稻的起源假说之一 , 对我国杂草稻基于形态特征和遗 传多样性等研究也支持这一假说 , 但是缺乏直接证据。利用质核互作雄性不育系 进行制种的三系杂交水稻是于上世纪 70年代初培育而成的 , 之后被迅速推广种 植并一直占在我国水稻种植面积的一半 由于利用杂种优势的杂交水稻自身是杂种 , 其后代如果存留田间会产生各种 生物型的性状分离 , 由此将杂交水稻的大面积种植与近年来杂草稻大量爆发联系 起来。根据细胞质基因主要是通过母系遗传的特点 , 三系杂交水稻人为引入的不 育细胞质基因可以成为研究栽培稻和杂草稻之间的关系的一个独特的标记。 我们首先从我国杂草稻发生最严重的辽宁、 江苏和广东省选取了 36 份杂草 稻, 利用传统的遗传学手段通过杂草稻和不育系及保持系间的杂交试验进行了野 败型和BT型细胞质不育基因的检测，结果在来自广东的4份杂草稻材料中检测到 了野败型不育细胞质基因，但没有检测到含有BT型细胞质不育基因。进一步，通 过分子标记方法又对取自广泛种植籼型杂交稻的 12 个省份的共 322 份杂草稻材 料进行野败不育细胞质基因进行检测 , 结果在 12 份杂草稻中检测到了该基因。 之后, 利用经典的遗传学杂交的方法验证基因检测结果的准确性。明确共有 16份杂草稻含有野败型不育细胞质基因。 基于母系遗传的理论 ,可以推断它们最初的母系亲本应该是含有相同细胞质 基因的杂交水稻。在演化过程中 ,杂交水稻后代的性状分离及与其它稻类间的基 因交流可能起了重要作用。 我们的这一结果首次为栽培稻参与到了杂草稻的起源和演化过程当中提供 了直接证据。说明了杂草稻的起源和演化过程是伴随着水稻的栽培不断进行的。 由于所有被检测的 358份杂草稻中仅有 16份材料与杂交水稻有直系亲缘关 系, 仅占不到 5%的比例, 说明中国近年来杂草稻的爆发与杂交水稻大面积种植没 有直接因果关系。 进一步可以推断我国的杂草稻起源和演化历史要早于杂交稻培 育和种植历史。 2.抗除草剂转基因水稻与杂草稻间基因漂移的发生会导致抗性基因逃逸的 生态风险。很多研究已经证明转基因水稻作为花粉供体向杂草稻发生基因漂移会 导致基因逃逸 , 其风险受到了广泛关注。 然而,水稻和杂草稻间的基因漂移是双向的 , 转基因水稻可以作为花粉受体 接受来自杂草稻的花粉。 杂草稻中杂草化基因的渗入可能使转基因水稻自身发生 向抗性杂草稻的快速演化 , 导致基因逃逸。 但对转基因水稻因反向基因漂移造成的潜在基因逃逸问题却缺乏足够重视。 杂草稻中检测出野败不育细胞质基因的证据 , 明确了栽培水稻作为起始直系母本 的自身杂草化的起源和演化途径存在。 为了评价杂草稻向转基因水稻发生反向基因漂移的风险 , 我们选择了没有杂 草稻发生的田块进行转基因水稻材料的种植 , 而在试验田周边稻田种植杂草稻材 料作为潜在的杂草稻花粉供体。 考虑到水稻材料间遗传背景和表型的差异可能影 响到基因逃逸的频率 , 我们选择了多个转基因水稻材料进行试验。 两种抗草铵膦转基因水稻 86B 和 Bar68-1, 以及分别以他们为恢复系育成的 抗草铵膦转基因杂交水稻u优 86B香125s/Bar68-1和各自的F2代被用于首年 的种植。每年收获的水稻材料用于次年在对应小区的种植 , 试验在草铵膦选择压 下连续进行三年。 试验第二年在种植两种转基因杂交水稻的 F3代群体的小区中发现了具有草 铵膦抗性且果皮为红色的类杂草稻植株 ;第三年在另外两个种植转基因杂交水稻 的