植物组织培养的基本技术.pdfVIP

第二讲 植物组织培养的基本技术 上节课程回顾 • 植物细胞组织培养的定义 • 基本原理 • 基本流程 • 基本分类 • 实际应用 下列有关细胞全能性的含义，正确的是： A 、每个生物体内的所有细胞都具有相同的功能 B、生物体内的任何一个细胞可以完成该个体的全部功能 C、生物体的每一个活细胞都具有发育成完整个体的潜能 D 、生物体的每个细胞都经过产生、分裂、分化、生长、衰老、死 亡的全过程 正确答案：C 在生物体内，细胞没有表现出全能性，而是分化为不同 的组织、器官，是因为： A 、细胞丧失了全能性 B、基因的表达有选择性 C、不同的细胞内基因不完全相同 D 、在个体发育的不同时期，细胞内的基因发生 了变化 正确答案：B 本讲主要内容 • 基本设备 • 培养基 • 外植体 • 培养条件 • 继代培养 • 炼苗与移栽 第一节 实验室结构、仪器设备及操作技术 一、植物组织培养实验室的结构及设计要求： 完整的植物组织培养室通常包括洗涤室、化学实验 室、接种室、培养室、细胞学实验室等部分。可以根据实 际需要和条件进行设计。 但从功能上至少包括化学实验室或准备室、接种室以及 培养室三部分，并且按顺序排列。 在化学实验室与接种室 之间应留有缓冲空间。 （一）化学实验室（准备室）： 1. 主要功能： 用于培养器皿的清洗、培养基的配制、分装和灭 菌、试管苗的出瓶及整理等工作。 2. 主要仪器设备及用品： 冰箱、天平、高压灭菌锅、pH计、干燥箱、实验 台、水槽、凉干架、药品柜、离心机、水浴锅、微波 炉、电炉、磁力搅拌器、蠕动泵、移液器、各种玻璃 器皿（烧杯、量筒、容量瓶、试剂瓶、三角瓶等）及 培养基分装用品等。 百分之一天平 千分之一天平 万分之一天平 各种型号的高压灭菌锅 移液器 （二）接种室（无菌操作室）： 1、功能：植物材料的灭菌、接种以及培养物 的继代转接等。 接种室要求保持洁净，与化学实验室之间应 设置缓冲室。 2 、仪器设备及用品： 超净工作台、紫外灯、小推车、搁架、磁盘、 接种工具（各种镊子、解剖刀、手术剪、普通剪 刀接种针、酒精灯、手持喷雾器、细菌过滤器 等）等。 超净工作台 （三）培养室： 1、功能：主要用于植物材料的培养。 要求室内洁净并能保持一定的温度、光 照以及湿度以适合植物材料的生长和分 化。 2 、仪器设备及用品： 培养架及灯管、摇床（振荡器）、空 调、自动定时器、加湿及除湿器、光照培养 箱、温湿度计灯等。 培养架 光照培养箱 多用振荡器 恒温振荡器 （四）细胞学实验室： 1、功能：主要用于培养材料的显微观 察及照相等。 2 、仪式设备及用品： 体视显微镜、普通显微镜、倒置显微镜、荧光 显微镜、配套显微照相装置、普通相机或数码相 机、切片机及配套制片及染色用品等。 体视显微镜 普通光学显微镜 倒置显微镜 倒置荧光显微镜 二、实验室基本操作： （一）洗涤： 1. 普通器皿：采用洗衣粉、洗洁精等中性洗 涤剂洗涤。 2. 难清洗器皿及移液管等：用水清洗后再用 重铬酸钾洗液浸泡，最后清水冲洗，或用超声 波仪清洗。 （二）灭菌： 1、器具灭菌：培养皿、解剖刀、镊子等 用品。 （1 ）干热灭菌：铝箔包好后，放于恒温干燥箱 内，150 ℃保温2小时，成本较高。 （2 ）