实验技术四革兰氏染色法.pptVIP

实验技术四革兰氏染色法 、实验目的 学习并初步掌握革兰氏染色法; 了解革兰氏染色法的原理及其在细菌分 类鉴定中的重要性。  二、基本原理 革兰氏染色法是1884年由丹麦病理学家 C.Gram创立的。用革兰氏染色法不仅能 观察到细菌的形态而且还可将所有细菌 区分为两大类:G+菌体反应呈深紫 色;G——菌体反应呈红色  二、基本原理 为什么通过革兰氏染色会出现这两种不 同反应的细菌呢?这是由这两类细菌的 细胞壁的结构和化学成份的不同决定的 肽聚糖厚度结构交联度网格孔径通透性脂类垣酸Po脂多糖 G+459m%。厚简单高致密小低2%+ 〔-5%薄复杂低疏松大高20%  实验器材 或枯草杆菌 菌种大肠杆菌、金黄色葡萄球菌 试剂草酸铵结晶紫、碘液、蕃红、95%酒精 其他器材 或沙黄 显微镜、酒精灯、载玻片、接种环、双层瓶、擦镜纸等  四、操作步骤 乙醇的作用包括脱水和溶脂作用,G+菌脱氏染色, 色后,细胞透性进一步降低,结晶紫一碘成假阳性 复合物不易被抽提出来,而保留在细胞内, 复染后仍呈现初染的深紫色;G-菌经乙醇 为宜,此时 处理后,脂类被溶解加大了孔径和通透性,顿色 结晶紫-碘复合物容易被抽提出来,复染后 就着上了蕃红的红色。 水洗 干燥—镜检菌体被染成兰紫色的是革兰氏阳性菌 被染成红色的是革兰氏阴性菌  思考题