实时荧光定量PCR技术专题报告.pptVIP

Q山西大亭 实时荧光定量PCR技术专题报告 内容 Real-time qPCr的概述 Real-time qPCr技术原理 Real-time qPCr操作步骤 Real-time qPCr结果分析 4出事及 概述 年 Kary mullis发明了PCR技术 ( polymerase chain reaction,聚合酶链反应) 半定量和定性分析 转录 1992年由日本科学家Hgi在报告中提出 Real-time qPCr技 术,并于1996年由美国 Applied Biosystems公司推出 相对或绝对定量分析 常规PCR与定量PCR的比较 113461891111 常规PCR 定量PCR 技术原理 时荧光定量PCR技术(Ra- Time Quantitative PCR)是指在 CR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监 恻整个PCR进程。荧光染料能特异性掺入DNA双链,发 出荧光信号,从而保证荧光信号的增加与PCR产物增加完 全同步。 ●未结合的 SYBR green I Pol ymerase 技术原理 SYBR Green I优点 戒本低,不需要探针 ≯适合初步检査,现用SYBR筛选,需要时再用 TaqMan精确定量 兼容溶解曲线,鉴定有无PCR杂带,有无引物二聚体 SYBR Green I缺点 不能做多重检测,没孔只能监测一个目的基因 无模版特异性