杆状病毒介绍模板标准模板.docVIP

1 v1.0 可编辑可修改 杆状病毒 关键词：昆虫病毒，杆状病毒， 核型多角体病毒，颗粒体病毒， 质型多角体病 毒 杆状病毒是一类在自然界中 专一性感染节肢动物 的 DNA病毒，病毒粒子呈杆状，基因组为 双链环状 DNA分子，DNA以超螺旋形式压缩包装在杆状衣壳内，大小在 90～180 Kb 之间。目前杆状病毒作为高效、安全的无公害生物虫剂广泛应 用于害虫防治。 杆状病毒只来源于无脊椎动物， 虽然已发现 600 多种杆状病毒， 但进行分子生物学研究的不到 20 种。杆状病毒的基因组为单一闭合环状双链 DNA 分子，大小为 80～160 kb，其基因组可在 昆虫细胞核 复制和转录。 DNA复制后组 装在杆状病毒的核衣内，后者具有较大的柔韧性，可容纳较大片段的外源 DNA 插入，因此是表达 大片段 DNA的理想载体。 其中，用作外源基因表达载体的杆状 病毒，目前仅限于核型多角体病毒 (nuclear polyhedrosis virus ，NPV)。该病 毒颗粒在细胞内可由多角体蛋白包裹形成长度约 1~5 m的包含体病毒， 呈多角体 形状。核型多角体病毒有两种形式： 一种为包含体病毒 (occluded virus ，OV)， 另一种则为细胞外芽生病毒 (budded virus ，BV)。 它们在病毒感染中扮演的角色不同，包含体病毒是昆虫间水平感染的病毒形式，昆虫往往是食入污染 OV的食物后引起感染。包含体病毒外层裹了一层蛋白晶体，即为 29 000 的多角体蛋白，它对病毒的水平感染起以下作用：①保护病毒颗粒在外界传播过程中免遭环境因素的破坏而失活。 ②保证病毒颗粒在适当的位置释 放，引起感染。昆虫中肠上皮局部的强碱性环境 (pH=，可使病毒颗粒释放蛋白酶 溶解多角体。 BV病毒是个体内细胞间的感染形式，由细胞芽生出 BV，进入血淋 巴系统中感染其它部位的细胞或直接在临近细胞内感染。 近几十年，有 关杆状病毒基因结构、功能和表达调节的研究进展迅速，其中研究最深入的是 mùxu 苜蓿银蚊夜蛾 (autogra — phacalifornica) 多核型多角体病毒 (multiple v1.0 可编辑可修改 nuclear polyhedro-sis virus ，MNPV)，简称 AcMNPV或 AcNPV。该病毒是杆状 病毒科 Baculoviridae 的原型，是一种大的、带外壳 的双链 DNA病毒，能感染 多种鳞翅目昆虫，被广泛用作基因表达系统载体。其它作为表达载体的杆状 病毒，主要是来自家蚕的 NP~(bombyxmoil ，BmNP~)。由于家蚕幼虫体内系统适合大规模地制备生产外源蛋白， 且成本低， 显示出良好的应用前景。 本文主要介绍 AcNPV病毒， BmNPV在许多方面与其具有共同的特征。 AcNPV 的基因表达分为 4 个阶段：立即早期基因表达、早期基因表达、晚期基因表达和极晚期基因表达。 前两个阶段的基因表达早于 DNA复制，而后两个阶段的基因表达则伴随着一系列的病毒 DNA合成。其中在极晚期基因表达过程中，有两种高效表达的蛋白， 它们是多角体蛋白和 P10蛋白：多角体蛋白是形成包含 体的主要成分，感染后期在细胞中的积累可高达 30％~50％ ，是病毒复制非必需成分，但对病毒粒子却有保护作用， 可使之保持稳定和感染能力另一类高效表达的极晚期蛋白为 P10 蛋白，也是一类病毒复制非必需成分， 可在细胞中形成纤维状物质，可能与细胞溶解有关。 多角体基因和 P10基因现在都已被定位和克隆这两个基因的启动子具有较强的启动能力， 因此这两个基因位点成为杆状病毒表达载体系统理想的外源基因插入位点。 杆状病毒基因组的结构和功能研究 杆状病毒基因组为双链环状 DNA分子。 DNA以超螺旋方式被压缩包装在杆状核衣壳 nueleocapsid) 内，核衣壳包被脂质蛋白囊膜 (envelope) 后形成病毒粒子。核衣壳包括衣壳 (capsid) 蛋白和髓核 (COle) 。其中衣壳蛋白是杆状病毒粒子的主要结构蛋白； 髓核由病毒 DNA分子和与其密切相关的碱性蛋白构成 。碱性蛋白同 DNA紧密结合以维持其复杂有序的超螺旋结构。 目前已知基因组全序列的杆状病毒有苜蓿丫纹夜蛾核型多角体病毒 (AcMNPV)b]、家蚕核多角体病毒 (BmNPV) 、黄杉毒蛾多核衣壳核多角体病毒 (OpMNPV)、舞毒蛾多核衣壳核多角体病毒 (LdMNPV) 、甜菜 夜蛾 多核 衣壳 核多 角体 病毒(SeMNPV)、棉铃虫核型多角体病毒 (HaNPV)，以及斜纹夜蛾核型多角体病毒 (SphMNPV)。 目前 AcMNPV基因组的研究最为深入， 它是双链超螺旋大分子环 2 v1.0 可编辑可修改 状 DNA，其大小为 90～160kb，约编码 154 个