CLSI系列文件---定量检测系统线性评价方法(EP6-A).docx

定量检测系统线性评价方法一EP6-A法 线性范用是分析方法的重要技术指标之一，线性范围越宽，说明该分析方法的性能越 好，越适用于临床。目前评价分析方法线性范围的方法很多，如：目测法、EP6-P法、美国 临床病理学家协会设备委员会（CAP-IRC）法、EP6-A法等。本文主要介绍了目前评价分析 方法线性范囤最好的方法即EP6-A法。 仪器熟悉阶段 在线性评价实验之前，仪器应当在实验室安装并使用相当长的一段时间，以便实验者 熟练掌握仪器的操作，并保证仪器经过正确的定标、实验样本经过适当的准备。如果仪器生 产商为实验者提供了培训，这也可以作为本阶段的一个部分。 线性评价实验 2.1实验样本的数目 线性评价实验的样本数目依据实验目的而确立：①如果实验目的是验证某方法的线性 范用，需要5?7个不同浓度水平的样本，这些样本的浓度必须覆盖厂家申明的线性范围，并 且每个样本重复测量2次。②如果实验目的是建立新方法的线性范用，需要7?11个不同浓度 水平的样本，这些样本的浓度必须覆盖预期的线性范国。一般情况下，新方法线性范国的建 立者希望有更多浓度水平的实验样本，并且这些实验样本的浓度应该比预期的线性范用宽 20%?30%,这样能确定最合适的线性范羽。此外，再根据检测系统不精密度的大小，每个 样本重复测虽：2?4次。③多元回归分析法评价线性范囤时至少需要5个不同浓度水平的实验 样本，并且实验样本越多，就越能准确地评价线性范围。 2.2实验样本的配制 EP6-A文件推荐使用高值和低值浓度的样本按特定的比例精确配制成一系列不同浓度 的样本，并且这些样本的浓度可以为等间距排列，也可以为不等间距排列，具体配制方法可 以参考文件后的附录A。在配制过程中，实验者应优先选用移液管法配制实验样本，因为用 移液管精确吸量髙值、低值浓度样本配制实验样本所产生的误差比称量法、配制复溶溶液法 要小。此外，实验者在吸取小体枳溶液时要特别小心。 2. 3实验样本的编号 在线性评价实验前，实验样本中分析物浓度可以为未知条件，只是此时必须对每个实 验样本进行编号来反映实验样本中分析物浓度的关系。如果实验样本中分析物浓度是按等间 距排列，且最髙浓度是最低浓度的n倍时，则可以把最低浓度的实验样本编为1号，其余实验 样本的编号按分析物浓度由低到高依次为2、3、4……no如果实验样本中分析物浓度不是按 等间距排列，实验者必须知道相邻实验样本中分析物浓度之间的关系，此时的样本编号可以 不为整数。 2.4基质效应 在实验过程中，实验者还应考虑基质效应对实验结果的影响，因此线性评价的实验样 本应该与临床实验室所用的测试标本相似，并且还应不含有对测试方法有干扰的因素如溶 血、黄疸、脂血等。如果无法达到上述条件，则应在实验报告中注明实验样本所采用的处理 方法或基质类型。以下为线性评价实验可能用到的样本类型，注意在评价一些特殊方法的线 性范用时要选用合适的基质。①患者样本混合液：想者样本混合液是理想的实验样本类型， 用接近预期线性范伟I上限、下限的髙值、低值浓度样本配制所有实验样本。②用推荐稀释液 稀释的患者样本：用于稀释髙值患者样本的稀释液可能对测试结果产生影响，因此必须使用 试剂生产商推荐的或者经过实验室证实为可接受的稀释液稀释患者样本。③在想者样本混合 液中添加分析物：如果患者样本中不存在干扰物质，添加的分析物不需要很高的纯度，反之 则应在实验报告中标明添加分析物的来源、纯度、预期影响等。如果添加的分析物为浓溶液, 则浓溶液的加入量应尽可能的少（小于总体积的10%）,并且记录所使用的溶剂。④用处理过 的低浓度物质或混合物质稀释的想者样本：如果可能，可以使用低浓度的患者样本作为稀释 液。另外，想者样本经过适当处理（如透析、热处理、层析）后可以降低其分析物浓度，但 是需要注意这些处理可以改变分析物的基质。⑤商品化质控物/定标物/线性评价实验物：如 果使用这些物质作为实验样本，则应将它们与患者样本同样地进行分析。如果没有合适浓度 的质控物/定标物/线性评价实验物，则可以将高值、低值质控物/立标物/线性评价实验物混 合得到中间浓度的实验样本。但需要注意的是，此时应保证分析物与正常生理状态下的形式 一样。⑥用英他不是推荐稀释液稀释的患者样本：使用这些物质作为实验样本时，应注意基 质差异对检测结果的影响，加入的稀释液也应尽可能少。⑦稀释不足/过度稀释的商品化质 控物：同样也应注意基质差异对检测结果的影响，并且影响的程度还随着稀释倍数不同而改 变，同时要保证质控物完全溶解。⑧水溶液：当使用水溶液作为实验样本时，基质效应可能 会影响分析物与试剂的反应。⑨苴他溶剂：当使用其他有机溶剂作为稀释剂时，基质效应可 能更大。 2. 5样本添加物的选择 当实验过程中需要在低浓度患者样本混合液中添加分析物时，需要选择介