微管解聚驱动蛋白Kinesin-13的功能与作用机理-细胞生物学论文-生物学论文.docxVIP

微管解聚驱动蛋白Kinesin-13的功能与作用机理-细胞生物学论文-生物学论文 ——文章均为WORD文档，下载后可直接编辑使用亦可打印—— 　　细胞的微管是细胞内骨架结构之一， 对细胞生命活动起至关重要的作用， 如细胞正常形态构建与维持、细胞内货物运输、细胞迁移、细胞 等[1,2]. 细胞功能的发挥依赖于细胞微管的动态不稳定性以及可调控性， 尤其是细胞在时间与空间上对其进行精确的调控。 细胞微管除了形成细胞内的骨架结构， 还可以在细胞 时期形成有丝 的纺锤体以及在细胞间期形成突出于细胞表面的特异化细胞器， 称之为纤毛（或鞭毛）。 纤毛作为细胞表面突出的天线, 既可以作为运动器官， 也可以作为信号接收器, 介导了细胞的运动与信号转导。 　　细胞微管由a和b微管蛋白构成， 两者形成异源二聚体首尾衔接组成微管原丝， 13根微管原丝组成的圆筒状结构形成了典型的微管， 其直径24~26 nm,壁厚5 nm, 中间腔直径15 nm, 长度不定。 由于组成微管的异源二聚体具有极性， 所以微管也具有极性，b微管蛋白指向正端， a微管蛋白指向负端[3,4]（ 图1（b））。 微管的负端指向细胞微管发生区微管组织中心（由中心粒组成）， 而中心粒是由9组3联体微管组成的中空结构， 发射出的微管辐射于整个细胞。 特异化的微管细胞器纤毛主要也是由微管蛋白二聚体组成，分为9+2型和9+0型的纤毛， 发生于由中心粒组成的基体（basal body）， 是纤毛的微管组织中心[5~7]. 　　生物学功能的有效发挥需要微管在体内进行动态的调节， 目前发现多种微管相关蛋白可以协助执行此功能[8]. 例如， tau蛋白可以稳定微管[9], katanin蛋白可以切割微管[10], EB蛋白家族和CLASP蛋白家族结合在微管的末端发挥调节作用[11,12]. 而驱动蛋白家族（Kinesin）成员较为特殊， 包含与微管侧壁结合并沿微管运动的蛋白， 以及作用于微管末端并调节微管动态学变化的蛋白[13,14]. 本文将重点阐述Kinesin中对于微管具有解聚作用的Kinesin-13亚家族成员在不同研究体系中的功能与作用机理的研究进展（表1）。 　　1 Kinesin-13 家族概述 　　在人类基因组中目前已知存在45种驱动蛋白，其中9种驱动蛋白参与了细胞微管的动态学变化。 遗传与生化实验证明Kinesin家族成员的共同点是拥有高度保守的马达结构域（motor domain）， 并且可以与微管结合[15,16]. 总体来讲， 马达结构域位于氨基端（N-terminal）的Kinesin行使沿微管正向运输功能， 位于羧基端（C-terminal）的Kinesin行使沿微管负向运输功能， 而位于中部的， 则不会沿微管运输， 但执行微管解聚功能， Kinesin-13就属于此分类[13,14]（图1（a））。  　　但是目前的研究表明， 一些特殊的Kinesin并不遵循此规律， 例如， Kinesin-8和Kinesin-14可以分别沿微管进行正向与负向运输， 但是同时也可以解聚微管[17,18].那么微管是怎么被微管解聚驱动蛋白Kinesin-13解聚的？ Kinesin-13一般形成二聚体结构执行相应微管解聚的功能[13]. 总体来说， 微管解聚驱动蛋白可以造成微管末端的微管原丝形成弯曲的构象， 从而使微管的末端逐个解离微管原丝的ab微管蛋白二聚体（图1（b））。 其详细的作用机制为： Kinesin-13不会沿着微管进行直接运动， 而是以展开的构象、相对微弱的结合力结合在微管的侧面， 然后向正负两端随机扩散[19~21]. 当Kinesin-13扩散至微管的末端， 空间结构发生变化， 紧密结合微管末端原丝， 使相邻的双条微管原丝空间结构发生弯曲， ATP水解产能， 促进微管末端二聚体的解离[21~27]. 在执行解聚微管过程中，依赖于Kinesin-13的ATP结合形式与ADP结合形式的循环， 来动态调节与微管结合的紧密程度， 以较高的效率促进微管解聚作用[26]. 　　研究表明， Kinesin-13的马达结构域对于微管的解聚是必需的， 并且马达结构域的存在足以在体外进行微管解聚作用[28]. 因此， 马达结构域是Kinesin-13家族具备微管解聚能力的共性。 尽管具有马达结构域的Kinesin-13已经具备微管解聚能力， 但是全长Kinesin-13则是进行微管解聚的更有效分子形式， 说明其他的功能域也是必需的[19,29]. Kinesin-13的N端结 构 域 对 于 蛋 白 的 亚 细 胞 定 位 是 必 需 的 , 而Kinesin-13 的 C 端结构域对于二聚化是必需的 （ 图1（a））。 而 富 有