杨树植组织培养.pptVIP

杨树组织培养 报告人:张文林 2015.7.16 1、培养棊及外源激素的选择 2、外植体 3、分化培养 4、生根培养 5、杨树组织培养中应注意的问题 及其解决方法 杨树(Pop|ar)是重要的速生经济树种。扦插是 杨树的传统繁殖方式,由于年龄效应,多代扦插后 容易出现退化,通过脱毒复壮和杂交育种后,性状 才能恢复。近年来生物技术的发展为杨树快繁和遗 传改良开辟了广阔的前景。通过嫩枝、幼茎、嫩叶、 叶柄、生长点和原生质体等的离体培养,可在短期 内获得大量优质杨树苗木。 一.培养基及外源激素的选择 1、培养基的种类 培养基的种类是影响组培苗生长的关键因素。目 前,在杨树组织培养的过程中MS、1/2MS、WPM等培养 基都有广泛的应用。MS与WFM培养基均属于高盐培养 基,可以提供木本植物生长所需的盐类。 .培养基及外源激素的选择 张蕾等在京2杨再生体系建立的研究中提出,由 于京2杨生长需要较高的营养,MS和WPM培养基明显 优于GMS培养基,且MS培养基更适于腋芽的启动和生 长。在35杨叶片不定芽诱导过程中,WPM培养基诱导 芽迅速,芽发育正常且集中生长于切面大小叶脉处, 各项指标均优于MS培养基。不同杨树的生长环境与 生物学特性不同,导致适合其诱导、增殖及生根生 长的培养基不同。所以,杨树组织培养时,不能片 面评价培养基的优或劣。 .培养基及外源激素的选择 2.外源激素的选择 植物组织培养过程中,外源生长调节剂是影响培 养物形态建成的主要因子,细胞分裂素主要用于促进 细胞分裂和由器官或愈伤组织上分化不定芽,生长素 则被用于诱导细胞的分裂和根的分化。在杨树的分化 培养过程中,通常选用的细胞分裂素是6-BA、ZT KT等,生长素为NAA 培养基及外源激素的选择 康薇等对美洲黑杨叶片离体再生的研究中指出 不同细胞分裂素与0.02mg/LNAA配合诱导叶片不定 芽,其效果差异明显,0.02mg儿L6-BA分化率为 91.1%,T次之,KT浓度小于0.2mg/L时只分化出根。 .培养基及外源激素的选择 Wang等在对银中杨茎段的离体再生研究中指出, 采用MS为基础培养基,附加较低浓度的TDZ,采用正常 光和黄光为光源,有利于银中杨茎段不定芽的分化, 而采用B5为基础培养基附加较高浓度的TDZ会对不定芽 的分化产生抑制。将TDZ与6-BA配合使用效果明显优 于单独使用,在新疆杨和河北杨叶片不定芽诱导的过 程中添加0.25mg/L6BA+0.01mg/TDZ与单独使用TDZ 相比,河北杨与新疆杨叶片分化率分别增加了14.82% 和25.00%。 .培养基及外源激素的选择 陈伟纶等和诸葛强等的研究中也均发现此种现 象。不同的细胞分裂素其作用机理不同,以一定比 例配合使用,可以实现生物学的互补效应,有望在 组织培养中产生更理想的效果 二、外植体 1、外植体的选择 任何具有完整细胞核的植物细胞都具有细胞全能 性。研究发现,与茎尖分生组织接连的组织具有较强 的形态发生能力。因此,外植体选取的原则为尽量选 择幼嫩的部位,外植体越幼嫩,植株越容易再生。目 前,国内外研究者均采用直接采集外植体或采用截取 水培或沙培后长出幼嫩部分作为外植体的方式,进行 离体快繁。