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Bcl-2抑制剂对黄芪注射液减轻缺氧缺糖/复氧复糖大鼠海马神经元凋亡的影响
董雅洁1,高维娟2,钱 涛3,卢锴锋1,朱炎杰1,谢亚芹1
(1.承德医学院病理生理学教研室,河北 承德 067000;
2.河北中医学院,河北 石家庄 050200;
3.河北省人民医院,河北 石家庄 050051)
【摘要】 目的 探讨黄芪注射液(AI)对Bcl-2抑制剂(TW-37)作用下的缺氧缺糖/复氧复糖(H/R)大鼠海马神经元凋亡的影响。方法 取原代培养8 d的胎鼠海马神经元,随机分为6组:正常对照组、H/R组、AI组、AI溶剂对照组、Bcl-2抑制剂(TW-37)+ H/R组、TW-37+AI+H/R组。除正常对照组外,各组均进行缺氧缺糖0.5 h,再于复氧复糖后七个时间点(0 h、0.5 h、2 h、6 h、24 h、72 h、120 h)分别进行指标检测。采用MTT法检测细胞活性,western blot法和RT-PCR法检测海马神经元Caspase-3蛋白和mRNA的表达。结果 与正常对照组比,除0h外,H/R组海马神经元活性明显降低(P0.05),Caspase-3蛋白及Caspase-3 mRNA表达均明显增强(P0.05);与H/R组相比,除0h外,AI组海马神经元活性明显增高(P0.05),Caspase-3蛋白及mRNA表达均明显降低(P0.05);而AI溶剂对照组、TW-37+ H/R组及TW-37+AI+H/R组则无显著差异(P0.05)。结论 黄芪注射液可通过激活Bcl-2抗凋亡机制增强H/R大鼠海马神经细胞活性、降低Caspase-3表达,Bcl-2是黄芪注射液抑制H/R大鼠海马神经元凋亡的重要靶点之一。
【关键词】 黄芪注射液;Bcl-2抑制剂;缺氧缺糖/复氧复糖;海马神经元;细胞凋亡;Caspase-3
【中图分类号】 R363 【文献标志码】 A
[项目基金] 河北省科技支撑计划项目);河北省普通高等学校高层次人才科学研究计划项目(No. GCC2014031);河北省教育厅青年基金项目(No. Q2012002);承德医学院自然科学研究计划项目(No. Q201506);河北省高校重点学科建设项目资助(冀教高【2013】4号?病理学与病理生理学)
[作者简介] 董雅洁(1980—),女,硕士研究生,研究方向:脑血管病发病机制及中医药防治。Email:dyj9606@163.com。
[通讯作者] 高维娟(1966—),女,教授,研究方向:脑血管病发病机制及中医药防治。Email:gwj6088@163.com。
The influence of Bcl-2 inhibitor on the alleviation action of astragalus injection on apoptosis of hippocamal neurons of rats induced by hypoxia /hypoglycemia and reoxygenation
DONG Ya-jie, GAO Wei-juan2, QIAN Tao3, LU Kai-feng1, ZHU Yan-jie1, XIE Ya-qin1
(1.Department of Pathophysiology, Chengde Medical College, Chengde 067000, China; 2.Hebei University of Chinese Medicine, Shijiazhuang 050200, China;
3.Hebei General Hospital, Shijiazhuang 050051, China.)
[Abstract] Objective To observe the influence of Bcl-2 inhibitor (TW-37) on the alleviation action of astragalus injection (AI) on apoptosis of hippocamal neurons of rats induced by hypoxia /hypoglycemia and reoxygenation (H/R). Methods The hippocampal neurons were isolated from fetal rat and cultured for eight days. The cells were randomly divided into six groups: normal control gr
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