陈静研究生文献汇报PPT.pptVIP

在PAK4-LV组中，八个中的六个小鼠表现出骨致瘤性，而在对照组中，对骨没有转移亲和力。通过BLI和X线检查证实乳腺癌向上颌骨和肱骨的转移。 对PAK4高表达小鼠的骨切片进行免疫组化染色。 * * 核PAK4-LIFR轴在ERα阳性乳腺癌细胞骨转移中的作用 文献出处 陈静 * Contents 简介 1 2 方法 1 讨论 2 3 4 结果 摘要： 雌激素受体α(ERα)阳性乳腺癌相关骨转移的机制尚不清楚.本文报道核p21活化激酶4(nPAK4)是依赖于17β-雌二醇(E2)的雌激素受体(ERα)介导的反式激活的新的强烈抑制剂，通过靶向白血病抑制因子受体(LIFR)，促进α阳性乳腺癌中PAK 4-ERα轴介导的骨转移。 对临床乳腺癌标本的评价表明，nPAK4与ERα表达有关，与骨转移性乳腺癌预后不良有关。在E2刺激下，PAK4与ERα结合，从细胞质共转运到细胞核。nPAK4增强ERα阳性乳腺癌细胞的体外侵袭能力，促进乳腺癌的体内转移。 很明显，nPAK4通过靶向骨转移抑制因子LIFR促进ERα阳性乳腺癌细胞的转移。引人注意的是，PAK4的核聚集可能促进侵袭性表型的产生，提示nPAK4是ERα阳性乳腺癌骨转移的一种新的预测生物标志物。 * LIFR： 白血病抑制因子受体，是ERα下游靶基因之一。已被证明具有抑制乳腺癌骨转移的作用 PKA4： P21活化激酶4，经典的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，在细胞信号转导中起重要作用，并参与多种细胞过程。已证实在大多数人类癌细胞以及在临床样品中PAK4过表达。 ERα： 雌激素受体α，它与β-雌二醇（E2）形成复合体，进入细胞核，从而促进新的蛋白质合成，具有引起细胞增殖的作用。 transactivation: 反式激活，激活因子(如转录、翻译激活因子等)调控基因表达时，由于蛋白质直接结合或间接作用，引起基因表达激活或增强的调控作用。本文中ERα是一种反式激活因子。 研究背景： 乳腺癌是全世界女性癌症死亡的第二大原因，乳腺癌对45岁以下妇女的影响呈上升趋势。大约75%的乳腺癌是雌激素受体α阳性(ERα)和相关的骨转移引起的发病率和死亡率的晚期乳腺癌患者。目前，我们对骨转移的重要组成部分-转化和定向运动-的理解尚不清楚，目前还没有有效的治疗方法来延长骨转移患者的生存。 p21-活化激酶4(PAK4)癌基因在包括乳腺癌在内的多种人类癌症中扩增和/或过度表达。在细胞水平上，PAK4信号调节了许多细胞通路，包括转化、细胞骨架组织、细胞运动和细胞周期调控。然而，核PAK4信号在乳腺癌转移中的作用尚不清楚。 3.1 ERα阳性乳腺癌细胞中nPAK4表达增高与骨转移及不良临床结果的关系 骨转移性乳腺癌（BMBC组）的nPAK4表达量明显高于非骨转移性乳腺癌（NMBC组）的。 按照ERα表达阳性或阴性，把95例骨转移性乳腺癌患者分为两组，数据显示在ERα阳性患者体内nPAK4表达量高于ERα表达阴性者。 两张具有代表性的染色组织切片图，分别显示了乳腺癌骨转移患者体内nPAK4阳性和阴性情况。 95例乳腺癌骨转移患者按照nPAK4表达阳性或阴性分为两组，54例nPAK4表达阳性存活时间较短，值为47.5±4.7个月；41例nPAK4表达阴性存活时间较长，值为73.5±7.1个月。 95例乳腺癌骨转移患者例里有57例ERα表达阳性患者，把他们按照nPAK4表达阳性或阴性再分为两组：38例nPAK4表达阳性存活时间较短，值为48.6±6.0个月；41例nPAK4表达阴性存活时间较长，值为71.7±9.7个月。 187例乳腺癌非骨转移患者里按照nPAK4表达阳性或阴性分为两组：89例阳性，98例阴性。两组的存活时间差别不明显。证明nPAK 4在NMBC组中的表达对预后的影响不明显。 3.2 PAK4与ERα相关 用免疫荧光法检测ERα阳性乳腺癌组织中PAK4的表达情况。结果显示PAK4和ERα在ERα阳性乳腺癌组织的细胞核内有明显的共定位。第二排图是第一排图的2.5倍放大效果。 用PAK4抗体或IgG免疫沉淀MCF-7细胞和ZR-75-30细胞的裂解液。用免疫印迹法检测内源性ERα和PAK4。免疫共沉研究结果表明，内源性PAK4与MCF-7和ZR-75-30细胞内源性ERα相关。 谷胱甘肽S-转移酶(GST)下拉分析，观察到PAK4的N端(1-201AA)和ERα的DNA结合区(181-263AA)是PAK4-ERα相互作用不可缺少的部分。结果表明PAK4与ERα是相关的。 免疫荧光染色法处理用含有或不含E2处理后的MCF-7细胞，PAK 4(绿色)、ERα(红色)、细胞核用DAPI(蓝色)染色