急性经口毒性试验.docxVIP

急性经口毒性试验 2.3.1.1 目的 1) 检测消毒剂对实验动物的急性毒性作用和强度。 2) 为亚急（慢）性毒性等试验提供剂量选择的依据。 2.3.1.2 实验动物 小鼠或大鼠任选一种，雌雄各半。小鼠体重 18g～22g，大鼠 体重 180g～220g，根据不同的计算 LD50 方法，选用适当的动物数量。 2.3.1.3 试验分组 如应用概率单位 - 对数图解法计算 LD50，随机分为 5 个～ 6 个 剂量组。通常最高剂量组的动物死亡率应≥ 90%，最低剂量组动物死 亡率应≤ 10%。可先以较大的组距较少量动物进行预试，找出其粗略 致死剂量范围，然后再设计正式试验的剂量分组。 2.3.1.4 操作程序 1）动物的准备：试验前，一般禁食过夜，不限制饮水。 2）受试物的配制：常以水或食用植物油为溶剂配制成溶液，或采用 0.5%羧甲基纤维素配制成混悬液。灌胃给予受试物的最大容量，小鼠不超过 0.2ml/10g 体重，大鼠不超过 1.0ml/100g 体重。 （3）染毒方法：用灌胃方式将受试物一次给予动物。若受试物 毒性很低，一次灌胃容量太大，可在 24h 内分成 2 次～ 3 次给予，其 总剂量作为一日剂量计算。 （4）染毒后观察动物的中毒表现和死亡数及死亡时间，并对死亡动物和观察期满处死动物进行尸体解剖， 肉眼观察，发现有异常的 组织或脏器，尚需进一步作组织病理学检查。观察时间 14d。 2.3.1.5 LD 50 的计算方法 根据给受试物后 14d 内的各剂量组动物死亡率计算 LD50 ( 半数致死 剂量)。 2.3.1.5.1 概率单位 - 对数图解法： 1）根据各剂量组动物死亡率，从表 2-9 中查各组的概率单位。因死亡率为 0% 和 100%的概率单位，与所试动物数有关，故需另在表 2-10 中查找。 例如：对死亡率为 45%的概率单位，可查表 2-9 。先在表的左侧纵标目上找到 40 ，而后在表的上行横标目处找到 5，两者交叉点处的 4.87 ，即为 45% 的概率单位。 又如 : 某组用 10 只实验动物，如果全部存活 ( 死亡率为 0%)，查表 2-10 ，其概率单位为 3.04 。 表 2-9 百分率 - 概率单位换算 表 % 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 0 .. 2.67 2.95 3.1 2 3.25 3.36 3.45 3.52 3.59 3.66 10 3.72 3.77 3.82 3.87 3.92 3.96 4.01 4.05 4. 08 4.12 20 4.16 4.19 4.23 4.26 4.29 4.33 4.36 4.39 4. 42 4.45 30 4.48 4.50 4.53 4.56 4.59 4.61 4.64 4.67 4. 69 4.72 40 4.75 4.77 4.80 4.82 4.85 4.87 4.90 4.92 4. 95 4.97 50 5.00 5.03 5.05 5.08 5.10 5.13 5.15 5.18 5. 20 5.23 60 5.25 2.28 5.31 5.33 5.36 5.39 5.41 5.44 5. 47 5.50 70 5.52 5.55 5.58 5.61 5.64 5.67 5.71 5.74 5. 77 5.81 80 5.84 5.88 5.92 5.95 5.99 6.04 6.08 6.13 6. 18 6.23 90 6.28 6.34 6.41 6.48 6.55 6.64 6.75 6.88 7. 05 7.33 注: 横标目数字为死亡率的个位数，纵标目数字为死亡率的十位数。 表 2-10相应于反应率为 0 ％及 100％的概率单位 该组动物数  反 应率  该组动物 数  反应率 0% 100% 0% 100% ... ... ... 11 3.00 7.00 2 3.85 6.15 12 2.97 7.03 3 3.62 6.38 13 2.93 , 7.07 4 3.47 6.53 14 2.90 7.10 5 3.36 6.64 15 2.87 7.13 6 3.27 6.73 16 2.85 7.15 7 3.20 6.80 17 2.82 7.18 8 3.13 6.87 18 2.80 7.20 9 3.09 6.91 19 2.78 7.22 10 3.04 6.96 20 2.76 7.24 （2) 用方格纸绘散点图，横轴表示剂量的对数值 (X) ，纵轴为 概率单位值 (Y) ，将各组数值点在图上。 3) 按各点的分布趋势，用直尺绘出一条最适合于各点的直线，使线上方的点到线的总距离与线下方的点到线的总距离相近， 此线应尽量靠近概率单位为 5 的点及附近的点。 （4）