常用血细胞化学染色原理及应用.pdfVIP

常 用 血 细 胞 化 学 染 色 原 理 及 应 用 （1）过氧化物酶染色的原理和临床意义（ POX） [ 原理 ]? 粒细胞和单核细胞胞浆中含有的过氧化物酶能将底物过氧化氢分解，产生新生态氧，它将四甲基联苯 胺氧化为蓝色联苯胺。后者进一步变成黑色化合物，沉积于胞质内。 正常血细胞的染色反应： 1. 粒细胞系 原粒大多数呈阴性反应，有点渴出现少量蓝黑色颗粒。自早幼粒致成熟中性郡城阳性反应，细 胞月成熟，阳性越强。中性分叶核强阳性，嗜酸性粒细胞阳性反应最强，其阳性颗粒比中性粗大，有折光性。 定位于胞质内。嗜碱性粒细胞呈阴性反应。 2. 单核细胞系 - 原始单核呈阴性反应，幼稚单核及单核呈弱阳性 , 阳性颗粒少而细小，均匀分布，有时也可呈阴 性反应。 3. 红细胞系、淋巴细胞系、巨核细胞系、浆细胞系 均呈阴性。有的巨噬细胞可呈阳性。 （2）过碘酸 - 雪夫染色的原理和临床意义（ PAS） [ 原理 ]? 过碘酸 - 雪夫又称糖原染色。胞浆内存在的糖原或多糖类物质（如黏多糖、黏蛋白、糖蛋白、糖酯等） 中的乙二醇基经过碘酸氧化，转变为二醛基，与雪夫试剂中的无色品红结合，形成紫红色化合物而沉积于胞浆 中糖原类物质所存在的部位。该反应称为过碘酸 - 雪夫（ PAS）阳性反应。 正常血细胞的染色反应： 1. 粒细胞系 原粒细胞多呈阴性 , 至早幼粒至中性分叶核粒细胞呈阳性反应， 并随细胞熟，阳性反应的强度 逐渐增强。嗜酸粒细胞本身不着色，而颗粒之间的胞浆呈红色，嗜碱粒细胞为阳性反应，阳性物质为大小不一 的紫红色颗粒。 2. 单核细胞系 原单位阴性，幼单为（ +）阳性反应，单核细胞为（ +）~ （++）阳性反应。 3. 淋巴细胞系 大多数淋巴细胞为阴性反应，少数淋巴细胞可为（ +）阳性反应。 4. 红细胞系 红细胞系的各个阶段皆呈阴性反应。 5. 巨核细胞系 -- 巨核细胞和血小板呈弥散性和粗大颗粒状强阳性反应。 6. 其他 浆细胞呈阴性反应 , 少数呈较弱阳性。巨噬细胞可呈阳性反应。均定位于胞质内。 1 [ 临床意义 ] 1）急性白血病类型的鉴别 ? 红白血病的幼红细胞 PAS染色多呈阳性反应，阳性率高，反应强；成熟红细胞有时亦可为阳性； 急性淋巴细胞白血病的原、幼淋巴细胞 PAS染色多为红色颗粒或块状阳性反应； 急性粒细胞白血病的原粒细胞呈阴性或胞质呈弥漫淡色阳性反应； 急性早幼粒细胞白血病 异常早幼粒细胞的 PAS染色为阳性反应； 急性单核细胞白血病原、幼单核细胞 PAS染色阳性反应呈弥漫分布的红色细颗粒，巨核细胞白血病原巨核细胞 PAS染色呈阳性或强阳性反应，表现为红色颗粒或块状。 2 ）各类贫血的鉴别 ?MDS、缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血（曾称地中海贫血）的幼红细胞 PAS染色多为 阴性反应，有时可出现阳性反应；巨幼红细胞贫血、溶血性贫血、再障的幼红细胞 PAS染色为阴性。 3 ）其他细胞类型的鉴别 ?戈谢细胞呈强阳性反应；尼曼－匹克细胞 PAS染色为弱阳性，空泡中心阴性。非霍奇 金淋巴细胞 PAS染色呈阳性反应； R-S 细胞则为弱阳性或阴性反应。骨髓内转移的腺癌细胞 PAS染色呈强阳性 反应，表现为红色颗粒或块状。 （3）中性粒细胞碱性磷酸酶染色的原理和临床意义（偶氮耦联法）（ NAP） [ 原理 ]? 中性粒细胞内碱性磷酸酶在 pH9.4-9.6 时，能水解磷酸萘酚钠，释放出磷酸与萘酚，再以重氮盐与萘 酚耦联成不溶性有色沉淀于胞质内酶所存在的部位。 阳性—（ +）1 分：胞质见浅红色，无颗粒或有少量细小颗粒但小于胞质 1/4 面积。 （++）2 分：胞质见红色，有较粗红色颗粒但小于胞质 1/2 面积。 （+++）3 分：胞质见粗大红色颗粒，可达胞质面积 3/4 以上。 （++++）4 分：胞质见粗大深