阴道黏膜刺激试验.docxVIP

阴道黏膜刺激试验 2.3.5.1 目的 检测消毒剂对实验动物阴道黏膜的刺激作用和强度。 2.3.5.2 实验动物 选用健康、初成年的雌性白色家兔， 同一品系，体重 2.0kg~2.5kg 。 试验前应检查动物阴道口有无分泌物、充血、水肿和其它损伤情况。 如有炎症或（和）损伤，应弃用。最好选择动物的非动情期做试验。 2.3.5.3 试验分组 分为染毒组和对照组，每组 3 只。 表 2-16 阴道黏膜刺激反应评分标准 阴道组织反应 反应评分 A ．上皮组织 正常，完好无损 0 细胞变性或变扁平 1 组织变形 2 局部糜烂 3 广泛糜烂 4 B ．白细胞浸润 （每个高倍 视野） 无 0 极少 ＜25 个 1 轻度 26~50 个 2 中度 51~100 个 3 重度 ＞100 个 4 C．血管充血 无 0 极少 1 轻度 2 中度 3 重度伴血管破裂 4 D．水肿 无 0 极少 1 轻度 2 中度 3 重度 4 刺激反应积分 =A+B+C+D 2.3.5.4 操作程序 稀释使用的消毒剂采用黏膜消毒时应用液 5 倍浓度的溶液作为受试液。若应用液为原液的消毒剂则用原液作受试液。 对照组采用生理盐水。 将长度为 8cm左右的钝头软管与 2ml 的注射器连接。注射器和导管注满受试液备用。每只动物各准备一套。 一次阴道黏膜刺激试验的染毒方法：将动物仰面固定，暴露出会阴和阴道口。将导管用受试液或对照液湿润后轻柔地插入阴道 （4cm~5cm），并用注射器缓慢注入 2ml 受试液，抽出导管，完成染毒。对照组动物用生理盐水作同样处理。 多次阴道黏膜刺激试验的染毒方法：按上述 2.3.5.4 （ 3））的染毒方法，每隔 24h 重复染毒一次，连续 5d。对照组动物用生理盐水作同样处理。 由于动物阴道容积的个体差异，有时受试液注入后可能有溢出，可用消毒棉或软纸拭去。 末次染毒后 24h，采用气栓法处死动物，剖腹取出完整的阴道，纵向切开，肉眼观察是否有充血、水肿等表现，供病理取材时参考。然后将阴道放入 10%福尔马林溶液中固定 24h 以上，选取阴道的两端和中央 3 个部位的组织制片， HE染色后，进行组织病理学检查。 2.3.3.5 结果评价 组织病理学检查结果， 按表 2-16 规定对阴道黏膜的刺激反应进行评分。 将试验组 3 只动物 3 个部位的刺激反应积分相加后， 再除以观察总数（动物数× 3），得出试验组阴道黏膜刺激反应的平均积分，最大记分为 16（见表 2-16 ）。对照组评分方法同上。 将试验组平均积分减去对照组平均积分得出刺激指数后，按表 2-17 进行刺激强度分级。 (4) 当对照组动物阴道黏膜刺激反应平均积分大于 9 时，应采 用 6 只动物进行复试，以鉴别是否与操作损伤有关。表 2-17 阴道黏膜刺激强度分级 阴道黏膜刺激指数 阴道黏膜刺激反应强度 ＜1 无 1~＜5 极轻 5~＜9 轻度 9~＜12 中度 ≥12 重度