DB15T 2045-2020甜菜组培快繁技术规程.pdfVIP

ICS 65.020.20 CCS B 05 DB15 内 蒙 古 自 治 区 地 方 标 准 DB15/T 2045—2020 甜菜组培快繁技术规程 Technical code of practice of culture and rapid propagetion on sug arbeet 2020-12-24 发布 2021-01-24 实施 内蒙古自治区市场监督管理局 发 布 DB15/T 2045—2020 用于甜菜无菌苗的继代培养。成分为（1 L）：MS培养基4.74 g，蔗糖30 g，NAA 0.5 mg，KT 0.4 mg， 琼脂粉7.5 g。 4.4 生根培养基 用于甜菜无菌苗的生根培养。成分为（1 L）：MS培养基4.74 g，蔗糖30 g，NAA 1.2 mg，琼脂粉 7.5 g。 5 外植体的获取 5.1 种球的获取+ 选取健康、籽粒饱满、外观完好的甜菜种球。 5.2 腋芽的获取 在甜菜生殖生长期，选择生长健壮、无损伤、无病虫害的甜菜植株，剪取幼嫩主枝或侧枝。 5.3 花序的获取 在甜菜生殖生长期，选择生长健壮、无损伤、无病虫害的甜菜植株，剪取现蕾花序的末端约20 cm。 6 灭菌与萌发 6.1 灭菌前准备 制备无菌水、75 %酒精，0.1 %升汞，80 %次氯酸钠。 6.2 种球消毒 将甜菜种球磨光，用百菌清 （烟剂型）密闭熏蒸24 h后，在超净工作台中移至灭过菌的三角瓶中， 随后用75 %酒精消毒2 min，无菌水漂洗3 次，接着用0.1 %的升汞处理20 min，无菌水漂洗3 次，最后 将消毒后的种子接种于琼脂粉培养基上，每三角瓶（100 ml）25粒。 6.3 腋芽消毒 取回的主枝或侧枝剪成保留1～2个腋芽小段，装入烧杯放在自来水下冲洗1 h，冲洗后在超净工作 台上用75 %酒精消毒1 min，无菌水洗3 次，接着用80 %次氯酸钠消毒12 min，无菌水洗3 次，洗完后 按照形态学上端向上接种到继代培养基中，每三角瓶（100 ml）6个小段。 6.4 花序消毒 室外取回的花序放入烧杯中，放到自来水下冲洗花序1 h，冲洗后将花序切成1.5 cm左右长度的花 序小段，在超净工作台上将花序小段首先用75 %酒精消毒1 min，无菌水洗3 次，接着用80 %次氯酸钠 消毒2 min～3 min，无菌水洗3 次，洗完后按照形态学上端向上接种到继代培养基中，每三角瓶（100 ml） 6个小段。 7 无菌苗获取 7.1 种球成苗 2