DB15T 2050-2020奶山羊性控冷冻精液制作操作规程.pdfVIP

ICS 65.020.30 CCS B 44 DB15 内 蒙 古 自 治 区 地 方 标 准 DB15/T 2050—2020 奶山羊性控冷冻精液制作操作规程 Code of practice on production of dairy goat frozen sexed-semen 2020-12-24 发布 2021-01-24 实施 内蒙古自治区市场监督管理局 发 布 DB15/T 2050—2020 见附录A中 A.1。 5.1.2 精子分离用缓冲液的配制 见附录A中 A.2。 5.1.3 精子荧光染色液和食品红染色液配制 见附录A中 A.3。 5.1.4 精子染色原液配制 见附录A中 A.4。 5.1.5 精子收集液配制 见附录A中 A.5。 5.2 溶液灭菌 溶液在使用前进行高压蒸汽灭菌（120 KPa，20 min），对于不能高压灭菌的溶液使用0.22 ㎛过滤 器进行过滤除菌。 6 采精 6.1 准备 6.1.1 场地 采精场地应该保持平整、清洁、安静、遮光、无异味并进行定期消毒。 6.1.2 台羊 选择健康的母羊做台羊，并用保定架进行保定。 6.1.3 假阴道 假阴道安装前首先检查假阴道外壳、内胎是否有破损、裂缝和沙眼。将内胎的光滑面向里，放入外 壳内，使两端露出部分长度相当，将内胎漏出一端向外折叠置于对应外壳外则，另一端内胎外翻卷置 同一端外壳外侧，使内胎两端紧紧与外壳套牢，并用橡皮圈将两端扎紧固定。 用长柄镊子夹取75 %的酒精棉球，从内向外消毒内胎内壁，再用另一棉球消毒外壳上的内胎翻 边。待酒精挥发后备用。 假阴道夹层内注入温水，将消毒好的无菌集精杯安装在假阴道一端，用双连球向假阴道夹层内充 气至压力合适（用玻璃棒插入略有阻力）。用消毒纱布盖好放入 42 ℃恒温箱待用。采精前用玻璃棒醮 取少量润滑剂（凡士林油），均匀涂布于假阴道外口至内胎 1/3-1/2处。用温度计测量假阴道内的温 度，温度应为 38 ℃～41 ℃。 6.2 采精 种公羊采精前不宜饲喂过饱。并在采精前用干净的湿抹布对种公羊包皮及其周围进行擦拭，除去污 物，然后再进行采精。采精员蹲在台羊右侧后方，右手握假阴道，充气活塞向下，靠在台羊臀部，假 阴道和地面呈35度角。当公羊爬跨、伸出阴茎时左手轻托阴茎包皮，迅速将阴茎导入假阴道内。公羊 2 DB15/T 2050—2020 平衡后的精液在4 ℃±1 ℃条件下灌装、封口、印字，在细管上打印生产单位代号、品种、奶山 羊号、生产日期或批号（见附录 B）、性控标记等信息。 8.4.3 冷冻、包装与保存 在4 ℃条件下将分装后的细管按照棉塞同一方向码放在冷冻架上，然后移入冷冻仪中，按照程序 控制冷冻仪操作规程操作，冷冻结束后进行包装，包装应在-140 ℃以下进行，置液氮中保存。 9 入库前检查 性控冻精产品的质量应由专职的质量检验员负责检测，每批性控冻精入库前应进行常规检验，方 法按照GB/T 31582进行。符合以下要求判定为合格，方可入库。 细管无裂痕，封口严密，标识清晰； 解冻后活力不小于40 %； 解冻后精子37℃体外存活时间4h活力不小于0.01； 6 前进运动精子数不小于1×10 个； 精子畸形率不大于20 %； 细菌数不大于800个。 10 贮存、运输 按照NT/T 1234—2006中13、14执行。 4 DB15/T 2050—2020 A.3.1 配制 10 mL荧光染色液 将10 mg荧光染料H33342定溶于 10 mL超纯水中，在5℃条件下避光保存。配好的荧光染色液使用期 限为 90 d。 A.3.2 配制100 mL食品红染色液 将5 g食品红染料溶于100 mL超纯水中，0.22 ㎛过滤除菌，在5℃条件下避光保存。配好的食品红 染色液使用期限为 90 d 。 A.4 精子染色原液配制方法 配制100 m