蛋白乙酰化检测.pdfVIP

解螺旋 陪伴医生科研成长 蛋白乙酰化检测 1. 实验原理 （1）对于有蛋白特异的乙酰化抗体，可参照Western blotting 原理，提取蛋白，直接 用Western blotting 技术检测目的蛋白的乙酰化修饰水平 （2）对于没有蛋白特异的乙酰化抗体，可参考IP 原理。我们通常同时做如下两方面实 验： ①用A 蛋白的抗体把蛋白A 沉淀下来,再用乙酰化泛抗体来检测乙酰化A 的变化（本实 验步骤采取此法）。 ②用乙酰化泛抗体把所有乙酰化蛋白免疫沉淀下来,再用蛋白A 的抗体来检测乙酰化A 的变化。解螺旋/ 2. 实验目的 检查目的蛋白的乙酰化修饰水平。 3. 实验材料 3.1. 主要试剂 RIPA 裂解液（强）（上海碧云天生物技术有限公司） PMSF （上海碧云天生物技术有限公司） TSA （美国Sigma 公司） NAM （美国Sigma 公司） BCA 蛋白浓度测定试剂盒（上海碧云天生物技术有限公司）