第9章肠杆菌科.ppt

第九章 肠杆菌科检验 第一节 概述 大部分是人体的正常菌群 对人致病性较强、引起传染病： 鼠疫耶尔森菌、伤寒沙门菌 常引起肠道感染： 埃希菌属、志贺菌属、沙门菌属、耶尔森菌属 与医院感染有关的条件致病菌： 枸橼酸杆菌属、克雷伯菌属、肠杆菌属、泛菌属、沙雷菌属、变形杆菌属、普罗威登菌属、摩根菌属 分类： 近年来采用生化反应、抗原分析、核酸杂交和序列分析技术进行分类 与医学有关的肠杆菌科主要有33个菌属，常见有15个菌属 临床意义 肠道外感染: 呼吸道、泌尿道、中枢神经系统、菌血症、伤口感染等，鼠疫 肠道内感染: 埃希菌属、沙门菌属、志贺菌属、耶尔森菌属 形态、培养和生化特征： 变异性： 微生物学检验 分离培养 肠道外感染标本 无菌部位：BAP/巧克力琼脂 有杂菌标本：MAC、EMB 肠道感染标本 非选择性培养基：BAP 弱选择鉴别培养基：MAC、EMB 强选择鉴别培养基：SS 耶尔森菌选择琼脂 （CIN） 鉴 定 形态染色、菌落特点 氧化酶（-）触酶（+）硝酸盐还原（+） 常规生化鉴定：KIA、MIU、IMViC 全面生化鉴定：鉴定试剂盒 血清学鉴定（玻片凝集）：分群、分型 分子生物学鉴定 鉴定步骤： 科间鉴别 科内鉴别 属间 属内鉴别（种、群、型） 科内鉴别： 根据苯丙氨酸脱氨酶试验和葡萄糖酸盐试验将肠杆菌科14个菌属分为3个组： 苯丙氨酸脱氨酶（-）和VP（-）——埃希、志贺、沙门、枸橼酸、爱德华、耶尔森菌属 苯丙氨酸脱氨酶（-）和VP（+）——克雷伯、肠杆菌、哈夫尼亚、泛、沙雷菌属 苯丙氨酸脱氨酶（+）和VP（-）——变形、摩根、普罗威登菌属 苯丙氨酸脱氨酶试验： 苯丙氨酸 苯丙酮酸 + 三氯化铁→绿色反应 脱氨 复习要点 肠杆菌科细菌在形态结构、培养特性和生化反应方面有哪些共同特性？ SS、MAC中与选择鉴别作用有关的成分 KIA、MIU主要成分、原理及结果判断 致病因素： 侵袭力： K抗原——抗吞噬，抵抗抗体和补体作用 菌毛——粘附 内毒素： 肠毒素：不耐热肠毒素（LT） 耐热肠毒素（ST） 所致疾病： 肠道外感染： 泌尿系统感染、腹膜炎、胆囊炎、肺炎、阑尾炎、手术创口感染菌血症、败血症等,在新生儿可引起脑膜炎 尿道致病大肠埃希菌（UPEC) 脑膜炎/脓毒症相关大肠埃希菌（MNEC） 肠道内致病:腹泻 肠毒素型大肠埃希菌（ETEC) 肠致病性大肠埃希菌（EPEC) 肠侵袭型大肠埃希菌（EIEC) 产志贺毒素大肠埃希菌（STEC/EHEC) 肠凝聚型大肠埃希菌（EAEC） 菌毛（定植因子) 人类致病性大肠杆菌定居因子分为CFAⅠ、CFAⅡ二种。抗原性强，其抗体可阻抑细菌的粘附，已在动物制出菌毛疫苗，作为免疫预防的手段。 CFAⅠ、CFAⅡ基因均存在于质粒，此质粒同时编码肠毒素 肠毒素——LT、ST LT化学结构与致病机理 大肠杆菌LT与霍乱弧菌肠毒素有80%同源性 EIEC： 较大儿童和成人，类志贺样腹泻 侵袭结肠粘膜上皮细胞并在其中生长繁殖，释放内毒素，破坏细胞形成炎症和溃疡，导致腹泻，腹泻呈黏液脓血便，有里急后重 EIEC的大质粒与志贺菌编码侵袭性基因的大质粒高度同源 EIEC无动力、生化反应和抗原结构近似志贺菌 STEC： 出血性结肠炎和溶血性尿毒综合征（HUS） 致病因子——菌毛和毒素(Vero毒素\志贺毒素) 溶源性噬菌体编码（VT-1和VT-2），VT引起上皮细胞微绒毛的破坏。VT-2能选择性地破坏肾小球内皮细胞 血清型为0157：H7 近年从腹泻患者和HUS患者分离的非O157的血清型已超过100种 EAEC： 一群不产生LT/ST，没有侵袭力，不能用O：H血清分型，可黏附于Hep-2和HeLa细胞的大肠埃希菌菌株。可引起儿童水样腹泻、呕吐、脱水，偶有腹痛、发热和血便 生物学特性 微生物学检验 鉴定: 观察菌落、生化鉴定、血清学鉴定 KIA：A A + – MIU：+ + – IMViC：+ + – – 鉴 定 1、ETEC： 生化反应+血清分型+肠毒素测定 ST和LT的检测——生物学方法、细胞培养、免疫学、分子生物学方法 2、EPEC： 生化反应+血清分型 O157:H7菌落特征（MAC） O157:H7菌落特征（山梨醇麦康凯平板） 复习要点 如何分离鉴定五种引起肠道内感染的大肠杆菌？ 大肠杆菌在KIA、MIU、IMViC上的生化反应 第三节 克雷伯菌属  kl