绪论、第1章细菌检验技术(1).ppt

微生物(microorganism) 是存在于自然界的一大群个体微小、结构简单、肉眼直接看不见，必须借助光学显微镜或电子显微镜放大数百倍、数千倍，甚至数万倍才能观察到的微小生物 微生物的种类 临床微生物学检验技术 是医学检验专业的核心主干课程之一，是检验专业必修的重要专业课，是一门实践性和技术性非常强的课程。它综合了临床医学、病原生物学、免疫学、临床抗生素学和临床微生物学检验等多方面的知识和技能，侧重感染性疾病的病原体特征、感染性疾病快速、准确的病原学诊断策略和方法的研究，为临床感染性疾病的诊断、治疗和预防提供科学依据。 第一章 细菌检验基本技术 细菌的大小 以微米(μm)为测量单位 光学显微镜观察，其大小用测微尺在显微镜下进行 大肠杆菌电镜照片（×10 000） 霍乱弧菌电镜照片（ ×10 000） 细菌的结构 细胞壁中的基本结构———肽聚糖 细胞壁中的特殊结构 G+ 菌：磷壁酸、表面蛋白 G- 菌：外膜 肽聚糖的结构与组成 G+ 菌细胞壁肽聚糖组成： 聚糖骨架：（各种细菌均相同） N-乙酰胞壁酸（M）、N-乙酰葡糖胺（G） β-1，4 糖苷键 四肽侧链：（葡萄球菌） L-丙氨酸、D-谷氨酸、L-赖氨酸、 D-丙氨酸 五肽交联桥： 5个苷氨酸 G+菌细胞壁的肽聚糖结构 G+菌、G-菌细胞壁中各自的特殊成分 磷壁酸 占细胞壁干重的50%，是G+菌的重要表面抗原 表面蛋白 某些G+菌细胞壁表面有一些特殊蛋白成分A族链球菌表面—M蛋白 金黄色葡萄球菌表面—Ａ蛋白(staphylococcal protein A,ＳＰＡ) 脂多糖的组成 内→外： 脂质A： 内毒素的毒性和生物学活性的主要成分.是G-菌致病的主要因素，所有G-菌脂质A结构相似，无种属特异性，不同细菌产生的内毒素作用相似 特异多糖： 构成G- 菌的菌体抗原（O抗原），具有种或型特异性 特异多糖的缺失，细菌由S→R型 外膜的作用： 屏障结构——保护细菌；阻止某些抗生素的进入 LPS—— 致病物质；增强机体非特异性抵抗力，抗肿瘤等 细 胞 壁 的 功 能 维持菌体固有的形态 保护细菌抵抗低渗环境（菌体内高渗） 参与菌体内外的物质交换 菌体表面带有多种抗原分子，具有抗原性（磷壁酸、表面蛋白、外膜）可诱发机体的免疫应答。特异性抗原与血清学分型有关 致病作用SPA、M蛋白、LPS G+菌细胞壁缺失后，原生质仅被一层细胞膜包裹——原生质体 G-菌肽聚糖层受损后尚有外膜保护——原生质球 位于细胞壁内，紧包细胞质，结构与真核细胞基本相同 结构 脂质双层液态蛋白质相嵌 结构（不含胆固醇） 功能 物质转运、呼吸和分泌、生物合成、参与细菌分裂 ②质粒 plasmid 概念： 存在于细菌细胞质中的闭合环状双股DNA；染色体外的遗传物质；带有遗传信息、控制某些特定的遗传性状；能独立自行复制，随细菌分裂转移到子代细胞中 与细菌的遗传变异有关 非细菌生长所必不可少 可通过接合或转导等作用将有关性状传递给另一细菌 F质粒（致育性质粒）R质粒（耐药性质粒）等 ③胞质颗粒（内含物 ) 细菌细胞质中含有多种颗粒，大多为贮藏的营养物质 异染颗粒 ——如白喉棒状杆菌，有助于细菌鉴定 （四）核 质 由单一密闭环状DNA分子反复回旋卷曲盘绕组成松散网状结构 特点：无核膜、核仁及有丝分裂器 作用：细菌生长繁殖、遗传变异的物质基础 荚膜的化学组成： 多数为多糖，少数为多肽（炭疽杆菌）透明质酸（链球菌） 非生命活动所必须，荚膜的形成需要能量，与环境条件有关 具有抗原性：血清学分型的基础（荚膜肿胀试验） 有荚膜——M型或S型菌落 失去荚膜——R型菌落 鞭毛需用电子显微镜观察，或经特殊染色法使鞭毛着色增粗后才能在光镜下看到 鞭毛观察： 悬滴法、压滴法 半固体穿刺接种 平板点种 鞭毛染色 芽胞的形成 由芽胞基因决定 当营养缺乏尤其是C、N、P元素不足时，启动芽胞形成基因，形成芽胞 一般只在机体外才能形成芽胞 芽胞带有完整的核质、酶系统和合成菌体组分的结构，保存细菌的全部生命必需物质 与芽胞抵抗力强有关因素 芽胞含水量少，蛋白质受热后不易变性 具有多层致密的厚膜，理化因素不易透入 核心和皮质中含有吡啶二羧酸（DPA），DPA与钙结合生成的盐能提高芽胞中各种酶的热稳定性 芽胞的意义 抵抗力强的芽胞可在自然界中存活多年，成为潜在的传染源，可发芽成繁殖体具有致病性 芽胞对理化因素的抵抗力强，应以芽胞是否被杀死作为判断灭菌效果的指标 根据芽胞的形状、大小、位置，鉴别细菌 第一节  细菌形态学检查法(P5) 一、显微镜： 普通光学显微镜 暗视野显微镜 荧光显微镜 相