土霉素生产工艺.pdf

土霉素生产工艺 摘要： 目的：土霉素生产工艺的概述。 方法：土霉素提取工艺是通过黄血盐-硫酸锌作净化剂协同去除蛋白质等高分子 杂质，然后用树脂脱色进一步净化土霉素滤液，最后调pH至4.8左右结晶得到土 霉素碱产品。 关键词：生产工艺；土霉素；黄血盐-硫酸锌 1 土霉素概述 土 霉 素 又 称 为 地 霉 素 或 氧 四 环 素 ， 英 文名 称 （ Terramycin Oxytetracycline)属于抗菌素的一种，对多种球菌和杆菌有抗菌作用，对立克次 体和阿米巴病原虫也有抑制作用，用来治疗上呼吸道感染﹑胃肠道感染﹑斑疹伤 寒等，现今主要用于畜禽药及饲料添加剂。土霉素是一个典型的利用生物工程技 术生产的产品，生产工艺涉及种子培养、发酵、提取、过滤、脱色、结晶、离心 和干燥等重要的单元操作和工程概念。 1.1 土霉素简介 1.1.1 名称与化学结构式 中文名：土霉素 英文名：OXYtetracycline 化学名：(4s,4аR，5S，5аR，6S，12аS）-N-4-二甲胺基-1，4，4а ，5，5а ， 6，11，12а-八氢，5, 6，10，12，12а- 六羟基-6-甲基-1，11-二氧代并四苯-2- 甲酰胺。 分子式：C22H24N2O9 相对分子质量：460.58 1.1.2 性状与理化性质 [1] 土霉素又名氧四环素，为灰白色至黄色的结晶粉末，无臭，味苦，熔点是 180℃，在日光下颜色变暗在碱性溶液中 易破坏失效。土霉素盐酸盐为黄色结晶， 味苦，熔点 190～194℃，有吸湿性，但水分和光线不影响其效价，在室温下长期 保存不变质，不失效。盐酸盐易溶于水，溶于甲醇，微溶于无水乙醇，不溶于三 氯甲烷和乙醚，在酸性条件下不稳定。添加到饲料中，在室温下保存四个月，效 价下降 4%～9%，制粒时效价下降 5%～7%。 1.2 土霉素生产菌种 土霉素是由放线菌（龟裂链霉菌）所产生的抗生素。土霉素钙盐是发酵培养 液中入碳酸钙，经过滤，干燥而制得。 2 土霉素生产工艺 2.1 土霉素的生产工艺流程概述 土霉素生产工艺主要分为：发酵、酸化过滤、脱色结晶、离心干燥四个阶段 。其生产工艺流程，如图2.1： 土霉素工艺流程简图 2.2 发酵工艺流程 2.2.1 斜面孢子制备 首先培养三支斜面孢子, 斜面孢子的培养基是由麸皮和琼脂组成，用水配制 。培养孢子条件：斜面孢子在 36.5～36.8℃培养，不得高于 37℃。若 36℃超过 2 小时则生产能力明显下降，不可用于生产。而且在袍子培养过程中还需保持一 定相对湿度，湿度 55%～60%。培养时间96 个小时。将三支斜面孢子加入无菌水 之后制成悬浮液。将悬浮液放置于 4℃～6℃的冰箱中备用。 2.2.2 一级种子罐发酵 一级种子罐采用实罐蒸汽灭菌法灭菌。培养温度为 31℃，采用夹套式换热（ 自动温度调节），罐内生长弱，无动力设备，设备密封。发酵约28h，培养液可 趋于浓厚，并转黄色，种子培养液 pH 值为 6.0～6.4 时，移入二级种子罐。 2.2.3 二级种子罐发酵 二级种子罐采用实罐蒸汽灭菌法灭菌。培养温度为 31℃，采用夹套式换热（ 自动温度调节），有搅拌动力设备。二级罐发酵约28h，培养液外观深粽、稠、 有气泡，pH 大于 6.0 移入三级发酵罐。 2.2.4 三级发酵罐发酵 三级发酵罐采用实罐蒸汽灭菌法灭菌，接种量为 15～20%，发酵全程温度控 制在 30～31℃，分段培养。采用列管式换热（自动温度调节），有搅拌动力设 备。发酵过程，菌体大量生长，培养基快速消耗，需要对其进行补料控制。发酵 导致 pH 降低，需补氨水调节pH。产生的大量泡沫，需加消沫剂进行消沫。发酵 过程消耗氧气，需通氧补充，通气量为：0.8～1.0v/m。发酵过程通氨、补糖的 工艺具体控制的方法不甚相同。接种后发酵 pH 低于 6.4 时，开始通氨，通氨量 的多少参考pH。要求 100h 前 pH 在 6.3～6.5，100h 后 pH6.2～6.3，放罐前 8 小 时停止通氨。根据发酵液的残糖值补入总糖(即淀粉酵解液)，一般在 100h 前残 糖控制 4.0～5.0%，100h 至 150h 控制 3.5～4.0%，150h 至放罐前 6h 控制 3.0%。 在菌丝接近自溶期前放罐。 2.3 酸化过