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2019 山东省济北中学高二生物选修三 DNA 重组技术的基本工具无答案 高二生物下学期新授课学案 ： 中心备课人： 审核人： 课题： 1.1DNA重组技术的基本工具 姓名： 班级： 使用日期： 【学习目标】 1、简述 DNA重组技术所需三种基本工具的作用。 2、认同基因工程的诞生和发展离不开理论研究和技术创新。 【学习重点】 DNA重组技术所需的三种基本工具的作用。 【学习难点】基因工程载体需要具备的条件。 课前自主探究 一：基因工程的概念： 基因工程是按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过 和 等 技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的 和 。 由于基因工程是在 DNA分子上进行设计和施工的，因此又叫 。 二、基因工程的三个基本工具： 1、基因工程操作的基本工具有 _________ 、 _________ 和 _________ 2、限制酶主要是从 中分离纯化出来的， 它们能识别 中特 定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的 键断开。 DNA 分子经限制酶切割后产生的 DNA 片段通常有两种形式，即 _________ 和 _________ 。 3、DNA连接酶根据来源不同， 可以分为两类， 即 和 _________ 。 4、将外源基因送入细胞中需要载体。常用载体质粒的本质是 _________ 。基因工程中使用 的载体还有 。 课堂合作探究 1 / 8 2019 山东省济北中学高二生物选修三 DNA 重组技术的基本工具无答案 一：基因工程的概念： 基因工程的别名 操作环境 操作对象 操作水平 变异类型 基本过程 结果 二、基因工程的三个基本工具： 限制性核酸内切酶 --- “分子手术刀” 1）来源： 2）化学本质： 3）作用的化学键： 4）作用的特点： 5）作用结果： 2 / 8 2019 山东省济北中学高二生物选修三 DNA 重组技术的基本工具无答案 注意： 1. 中轴线两侧的双链 DNA 上的碱基是反向对称重复排列的。 限制酶是一类酶的统称，而不是单指一种酶。 2.DNA 连接酶——“分子缝合针” 1）化学本质： 。 2）作用： 。 3）作用部位： 。 4) 种类： 。 从大肠杆菌中分离得到： E.coliDNA 连接酶， 只能 将双链 DNA片段互补的 黏性末端 之间连接。 2. 从 T 噬菌体中分离到： T 连接酶， 既可以 “缝合 ”双链 DNA片段互补的 黏性末端 ，又可以 4 4 “缝合 ”双链 DNA片段的 平末端 ，但连接平末端之间的效率比较低。 讨论： DNA水解酶、 DNA解旋酶、 DNA连接酶、 DNA聚合酶的区别 3 / 8 2019 山东省济北中学高二生物选修三 DNA 重组技术的基本工具无答案 基因进入受体细胞的载体——“分子运输车” 1）作用： 2）化学本质： 2）作为运载体必须具备的条件 能自我复制 有切割位点 能与目的基因结合 能进入受体生物细胞并在受体生物细胞内复制并表达；有遗传标记基因 对受体细胞无害 比较容易得到 3）分子运载车的分类： 1） DNA水解酶：能够将 DNA水解成四种脱氧核苷酸，彻底水解成磷酸、脱氧核糖和含氮碱基 2） DNA解旋酶：能够将 DNA或 DNA的某一段解成两条长链，作用的部位是碱基和碱基 之间的氢键。 注意：使 DNA解成两条长链的方法除用解旋酶以外， 在适当的高温（如 94℃）、 重金属盐的作用下，也可使 DNA解旋。 （ 3） DNA聚合酶：能将单个的核苷酸通过磷酸二酯键连接成  DNA长链。 （ 4） DNA连接酶：是通过磷酸二酯键连接双链  DNA的缺口。 例 1．以下有关基因工程的叙述，正确的是 （ ） 4 / 8 2019 山东省济北中学高二生物选修三 DNA 重组技术的基本工具无答案 A、基因工程是细胞水平上的生物工程 B 、基因工程的产物对人类都是有益的 C、基因工程产生的变异属于人工诱变 D 、基因工程育种的优点之一是目的性强 例 2．在基因工程中用来完成基因的剪接的工具是（ ） A．限制酶和连接酶 B ．限制酶和水解酶 C ．限制酶和运载体 D 连接酶和运载 体 例 3.不属于质粒被选为基因运载体的理由是（ ） A．能复制 B ．有多个限制酶切点 C ．具有标记基因 D ．它是环状 DNA 例 4．右图表示限制酶切割某 DNA 的过程， 从图中可知， 该限制酶能识别的碱基序列及 切点是（） A． CTTAAG，切点在 C 和 T 之间 B． CTTAAG，切点在 G 和 A 之间 C． GAATTC，切点在 G 和 A 之间 D． CTTAAC，切点在 C 和 T 之间 巩固练习】 1．基因工程是在 DNA 分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本