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华大基因 HPV 基因分型检测 深圳华大基因研究院 内容提要 人类乳头瘤病毒（ HPV ）与宫颈癌 我国宫颈癌的现状 华大基因 HPV 基因分型检测服务 华大基因简介 华大基因简介 华大基因 ? 华大基因是全球最大的基因研究中心，建立了大规模测 序、 生物信息、克隆、健康、能源、农业基因组等技术 平台。 ? 华大基因已逐步将基因组领域的最新研究成果应用于临 床，同时将最新的基因检测技术应用于分子诊断中。 深圳华大基因研究院 临床检验中心 ? 深圳华大基因临床检验中心成立于 2007 年，隶属于深圳华 大基因健康事业部，同年获得 《医疗机构执业许可证》 。 ? 华大基因临床检验中心的临床基因扩增实验室于 2008 年成 功获得 卫生部临检中心的准入验收 。 ? 华大基因临床检验中心为独立的第三方医学检测实验室， 有出具 医学检验报告资质 。 ? 华大基因临检中心于 2009 年正式开展 临床检测服务 。 人类乳头瘤病毒（ HPV ）与宫颈癌 人类乳头瘤病毒 （ Human Papillomaviruses, HPV ） ? 双链 DNA 无包膜病毒 – 环状 DNA ，约 8Kb ； – 病毒颗粒直径为 50-55nm ； – 依靠宿主细胞进行复制、 转录和翻译 ； – L1 区是既保守又特异的区域，可作为 HPV 基因分型的 目标区域 。 1995 年 IARC 专题讨论会： 高危 型 HPV 持续感染是宫颈癌的主要 病因。 2008 年： Harald zur Hausen 因 发现 HPV 和宫颈癌的关系而获得 诺贝尔生理学或医学奖。 宫颈癌是目前唯一病 因明确，可以早发现、早 预防的癌症。 哪些型别属于高危型 HPV? ? 低危型： 6 、 11 、 42 、 43 、 44 、 53 、 81 ? 高危型： 16 、 18 、 26 、 31 、 33 、 35 、 39 、 45 、 51 、 52 、 53 、 56 、 58 、 59 、 66 、 68 、 73 、 82 （ 2005 年 IARC 专题讨论会） 来自世界各国的宫颈癌组织标本研究发现，高危 型 HPV16 、 18 型在宫颈癌患者中的感染率最高，约占 64% 。但是做 HPV 检测时，只检测 16 、 18 型是远远不 够的，还有约 36% 的宫颈癌是由其他型别的 HPV 病毒 引起的。 ? 基因检测早于细胞！ 高危型 HPV 的持续感染导致宫颈癌发生 （能精确到 DNA 水平） 基因水平检测方法 （只能精确到细胞水平） HPV 基因检测比传统的宫颈癌筛查方法更早发现 宫颈癌前病变，可以起到预防的作用，这样有利于宫 颈癌癌前病变的早发现、早诊断、早治疗。 非分子水平检测方法 HPV 不同亚型感染与许多疾病具有相关性 HPV 亚型（高危型） 临床病变 16 肛门生殖器疣、女阴上皮内瘤变、 上皮内瘤变、 CIN 、宫颈癌 18 生殖器疣、 CIN 、宫颈癌 31 、 35 、 45 、 52 、 56 、 58 、 66 、 68 肛门生殖器疣、 CIN 、宫颈癌 33 CIN 、女阴上皮内瘤变、宫颈癌 39 肛门生殖器疣、 CIN 、宫颈癌、 鲍 温样丘疹病 51 、 59 肛门生殖器疣 HPV 亚型（低危型） 临床病变 6 、 11 尖锐湿疣 我国宫颈癌的现状 我国宫颈癌的现状 ? 发病率世界第二 我国宫颈癌的现状 ? 发病率世界第二 ? 发病率逐年升高 数据来源 : 《 2009 中国卫生统计年鉴》 我国宫颈癌的现状 ? 发病率世界第二 ? 呈现年轻化趋势 （资料来源：《中国预防医学杂志》） ? 发病率逐年升高 华大基因 HPV 基因分型检测服务 目前常用的宫颈癌检测技术 非分子水平检测方法 基因水平检测方法 醋酸白试验 荧光 PCR 检测法 阴道镜检测 第二代杂交捕获法 宫颈刮片细胞学检查 分子导流杂交法 宫颈和宫颈管活组织检查 飞行时间质谱法 基因水平检测不但可以对 HPV 病毒进行分型检 测，而且还可以起到预防和警示作用，这样有利于 HPV 感染的早发现、早诊断、早处理。 HPV 基因分型检测的临床意义 宫颈病变风险提示 ASCUS 和低度病变的分流 术后随诊手段 疫苗接种前的有效性指导 降低筛查成本 The PCR-MS Base Method PCR 技术 : 1993 年诺贝尔化学奖 飞行时间质谱技术 : 2002 年诺贝尔化学奖 华大基因 HPV 基因分型技术 该检测方法的最大特点是将两种先进的检测技术整 合起来，从而形成巨大的技术优势。 MALDI-TOF-MS 原理 简 介 ? MassARRAY 平台的核心技术为 MALDI-TOF-MS ，即基质辅助 激光解析电离飞行时间质谱技术。 通过测定离子的质量电荷之比（ M/