SDSPAGE凝胶电泳操作.pdfVIP

SDS凝胶电泳操作 一、常规试剂的配制 1. 30% 聚丙烯酰胺贮液：丙烯酰胺 150g，甲叉双丙烯酰胺4g，双蒸水500ml，滤纸过滤 后，棕色瓶避光4 ℃保存； 2. 1.5mol/L，pH 8.8 Tris-HCl 分离胶缓冲液：18.15g Tris，用1mol/L HCl 定容至100ml，棕 色瓶避光4 ℃保存； 3. 1.0mol/L，pH 6.8 Tris-HCl 分离胶缓冲液：12g Tris，用1mol/L 调pH 至100ml，棕色瓶 避光4 ℃保存； 4. 10% SDS 溶液：10g SDS 加水定容至100ml，完全溶解室温保存； 5. 10% AP 溶液：0.1g AP （过硫酸铵）加水定容至1ml，用前新鲜配制； 6. 1×SDS电泳缓冲液：25mM Tris （3.0285g/L ），192mM 甘氨酸（14.41g/L），0.1%SDS （1g/L），pH 8.30 ； 7. 染色液：0.25g 考马斯亮蓝R-250 溶解于45ml 甲醇，45ml 水，10ml 冰醋酸，过滤除去 杂质； 8. 脱色液：45ml 甲醇，45ml 水，10ml 冰醋酸； 9. 固定液：50ml 甲醇，40ml 水，10ml 冰醋酸； 10. 2×SDS上样缓