开发灵敏度高、重复性好的侧流检验产品---第一部分_中译文.docxVIP

开发灵敏度高、重复性好的侧流检验产品---第一部 分：解决老问题的新途径 译者按：在某些网站发表的中译本似乎是机器翻译输出的，原文的翻译存在一些错误。因此业 为基生物科技有限公司从更专业的角度对原文进行了翻译 选择材料进行和采用新方法的生产工艺改善检验性能 侧流检验是适合在多种 POC 场合 或者现场使用的稳定实用技术。然而，该技术在要求非常灵 敏、重复性好或者需要获得定量结果的情况尚未广泛适用。近年，在各种非传统市场领域对该 技术的兴趣与日俱增。驱动侧流检验技术复兴的综合因素包括：现有技术面临专利压力，其他 拥有更好灵敏度、可重复性和定量性的新技术，或者结果的客观记录性；市场需要投入周期短 且投资合理的 POC 或现场使用的分析技术。 图1 侧流免疫检测技术作为 POC 或现场应用的优点 侧流免疫检测(lateral-flow immunoassay，LFIA)系统的优势众所周知(见图1)。其决定性的优点 在于该技术适合 POC 或者现场使用，具有投资小、入市快的特点，且应用范围广。这些优点是 其他当前正在开发的推定 POC 技术(包括传感器和基于阵列的技术)无法相比的。 侧流检验技术已经在一些子市场内得到引入和发展(见图2)。然而，生产适合这些子市场需要 的侧流检验产品一直面临挑战。随着应用扩展，增加了对技术的灵敏度、重复性和生产性的要 求。例如，要求定量和客观的读取/记录技术，能与实验室信息系统对接。除了改进材料、分 析技术、读取仪技术和生产工艺外，侧流检验开发也需要更多的学科交叉途径。 图2 在 POC 和现场应用的侧流检验免疫检测技术的子市场。 近年，涌现出一批生产侧流检验产品的新途径以适合这些需求。每种新途径都会促使我们用刷 新视角审视 IVD 公司如何生产这类产品的基本原理。 这是两部系列中的第一篇文章，阐述了开发和生产高灵敏、重复性好的 LFIAs 产品存在的挑战 性问题，对克服传统技术局限的革新进行了概述。本文审视传统生产技术和材料，不仅讨论每 个环节的局限，而且讨论克服这些局限的具体步骤。 硝酸纤维素膜 图3 侧流检验生产工艺路线梗概 图3描绘了侧流测试条的传统常规生产流程。IVD 行业内用于该系统的物料和工艺流程基本保 持不变。 硝酸纤维素膜(Nitrocellulose, NC)材料被大多数侧流检验产品系统选用。市场对其他材料的尝 试(例如：尼龙膜和 PVDF 膜)仅获得有限成功。究其原因包括成本、使用局限、新的化学和工 艺的知识要求和使用 NC 膜现有巨大经验积累库的惯性。 虽然 NC 膜也不是 LFIAs 中分析用膜的理想材料，但它的确具备某些在该应用领域的有用特性。 这些特性包括成本低、真毛细管流动、高蛋白结合容量、上手操作相对容易(有聚酯背衬)，具 备不同的芯吸速率和表面活性组分的产品唾手可得。 虽有这些积极的特性，NC 膜也有许多的缺点。后者包括批内批间性能重复性差、保质期问题、 易燃性和易损性(无背衬膜)，以及随环境条件易变特性，例如湿度。 对于 NC 膜的这些问题，检验开发者和 IVD 生产商要花费相当多的时间和精力优化化学配方以 克服材料内在问题。他们也优化生产工艺以保证产品在整个保质期内性能合格。仔细控制关键 步骤如分液、浸渍和烘干过程，注意对膜的化学和生物处理，以防在终产品中引入额外变量， 这些环节对产品成功至关重要。 膜的试剂分液 (划膜) 对于标准的 LFIAs 产品，NC 膜上至少有一条测试线和一条控制线。该过程使用分液器在单位 长度膜上分配恒量液体。IVD 生产商使用两种分液方法：接触式和非接触式。 接触分液系统中，喷头拖划膜表面，同时试剂泵驱动从喷头处释放一定量液体到表面上。该系 统简易价廉，然而，该过程喷头与膜表面接触会导致划痕。另外，由于液体进入膜的过程不仅 依靠膜表面与喷头的接触，而且与膜的吸液能力的一致性有关，线条宽度可发生变化。该变化 可成为读条器分析检测的主要问题，因为读取仪输出的结果与线的宽度相关。该问题可导致检 测结果不一致且完全不能定量。 图4 BioDot 公司的 XYZ 3050分液平台配有 BioJet Quanti 3000 和 AirJet Quanti 3000喷头 图5 使用接触式和非接触式分液方法对比，分液到膜上的蛋白线条宽度。 另一种选择是非接触式分液系统，例如 BioDot Inc.(Irvine, CA)的 BioJetQuanti 3000系统(见 图4)。BioJet 使用微电磁阀连接高精度步进泵，液体微滴喷到膜上，紧密交迭的液滴点构成 连续线条。试剂在液滴接触处被吸收入膜内，排除了膜表面与喷头的接触影响因素。因而，非 接触喷点的线条宽度比接触喷点更均一。使用接触和非接触式喷头喷点的线条宽度进行比较如 图5所示。 图6 BioD