大肠菌群总数的测定.pptVIP

实 验 八 大肠菌群最近似数的测定 大肠菌群:coliforms 最近似数:most probable number,MPN; 概念：大肠菌群系指一群在37℃ 24h能 发酵乳糖产酸产气，需氧或兼性 厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌， 包括肠杆菌科的埃希氏菌属、柠 檬酸细菌属、克雷伯氏菌属、肠 杆菌属。 单位：MPN/100mL（g）;一、实验目的;二、实验器材;三、方法 1、样品及其稀释（同细菌总数测定） 2、接种乳糖胆盐发酵管（3×3=9支） 3、鉴别培养（伊红美兰） 4、乳糖复发酵试验;1. 采样:无菌操作 2. 初发酵试验：吸取待检样品接种于乳糖胆盐发酵管内，10ml接种量采用双料发酵管，而lml及lml以下接种量采用单料管。每一接种量接种3管，置于35～37℃培养24士2h。将产酸、产气的发酵管按下列程序继续进行检验。 ;3. 分离培养：将产气的发酵管中的发酵液在EMB平板上划线分离，置于35～37C培养18 ～ 24h 革兰氏染色及镜检：于上述平板上长出的菌落中挑取1～2个大肠菌群可疑菌落进行镜检和革兰氏染色;4. 复发酵试验：将上述镜检之菌 落同