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F-7000荧光分光光度计使用操作步骤;2、计算机进入Windows XP视窗后,打开运行软件(如图1)。;图1 FL Solution 2.1扫描界面;3、测试模式的选择:波长扫描(wavelength scan);图2 Method--“General”选项的界面;(3)在“Instrument”选项中设置仪器参数和扫描参数,如图3。;主要参数选项包括:
选择扫描模式“Scan Mode”:Emission/Excitation/Synchronous(发射光谱、激发光谱和同步荧光)。
选择数据模式“Data Mode”:
Fluorescence/Phosphprescence/Luminescence(荧光测量、磷光测量、化学发光)。
设定波长扫描范围。
;扫描荧光激发光谱(Excitation):需设定激发光的起始/终止波长(EX Start/End WL)和荧光发射波长(EM WL);
扫描荧光发射光谱(Emission):需设定发射光的起始/终止波长(EM Start/End WL)和荧光激发波长(EX WL);
扫描同步荧光(Synchronous):需设定激发光的起始/终止波长(EX Start/End WL)和荧光发射波长(EM WL)。
!!Attention:激发光终止与起始波长差不小于10nm。;选择扫描速度“Scan Speed”(通常选240nm/min)。
选择激发/发射狭缝(EX/EM Slit)。
选择光电倍增管负高压“PMT Voltage”(一般选700V)。
选择仪器响应时间“Response”(一般选Auto)。
选择光闸控制“□Shutter Control”打√,以使仪器在光谱扫描时自动开启,而其他时间关闭。
选择“Report”设定输出数据信息、仪器采集数据的步长(通常选0.2nm)及输出数据的起始和终止波长(Data Start/End)。
;!!Attention:Data Start/End需与“Instrument”选项中设置一致,否则所得到的数据点会逐渐减少,而无法作图。
(4)参数设置好后,点击“确定”。
;4、设置文件存储路径;(2)样品命名“Sample name”。
(3)选中“□Auto File”, 打√。可以自动保存原始文件和TXT格式文本文档数据。
(4)参数设置好后,点击“OK”。
;5、扫描测试;6、数据处理;图5 扫描谱图窗口;3、关机顺序(逆开机顺序实施操作):;图6 关闭运行软件;(2)约十分钟后,关闭仪器主机电源,即按下仪器主机左侧面板下方的黑色按钮(POWER)。(目的是仅让风扇工作,使Xe灯室散热)。
(3)关闭计算机。
;寻找激发波长的方法;1. 首先在发射光谱设置中输入一个激发光波长数值???如300 nm,设置发射光谱范围,通常起始值大于激发波长,小于激发波长的二倍,得到一个发射光谱,得到一个或几个发射波长的峰值
2. 重新在激发光谱中设置,输入步骤一中得到的发射波长,设置激发光谱范围,通常起始值大于发射波长的一半,小于发射波长,得到激发波长的峰值
3. 按照步骤二的过程,将几个发射波长都输入,得到几个激发波长
4. 重复步骤一的过程,输入步骤二,三中得到的激发波长,观察发射光谱的峰形,确定发射光谱。
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