中药五类新药赤芍总苷制剂的临床前药学实验研究设计.doc

中药五类新药赤芍总昔制剂的临床前药学实验研究设计 小药五类新药赤芍总昔制剂的临床前药 学实验研究设计 组员： 【实验目的】 通过赤芍总昔提取纯化与质量控制方案的设计和研究，掌握人孔树脂用于昔类成分 纯化的丄要影响因素和丁艺参数的方法，掌握屮药讥类新药原料的质量控制方法及技术要 求。 通过设计并完成屮药五类新药赤芍总昔制剂的临床药学实验硏?究，掌握屮药新药研 究程序和中药新药申报资料的技术要求。 熟悉我国屮药新药的分类、申报资料要求以及新药审批的基木程序。 【实验概述】 赤芍为毛您科植物芍药Paeonia lactiflora Pal 1.或川赤芍Paeonia veitchii Lynch 的T燥根。味苦，性微寒。归肝经。具清热凉血，散瘀止痛的功效。常用于温毒发斑，吐 血ifl血,目赤肿痛，肝郁胁痛,经闭痛经，癥痕积聚，跌打损伤,痈肿疮疡等症。［1］ 赤芍屮的化学成分主要有昔类成分，有赤芍昔（约3.5%-8%）,苯甲酰芍药昔，芍药内 酯背，苯甲酰疑基赤芍昔，耗基赤芍昔，赤芍昔元，胡萝卜昔等普，另外含有糅质（约 12.6%）、蔗糖、棕柵酸等［参考屮药鉴定书］。赤芍药材所含丰富的昔类成分总称为赤芍 总昔（TGP）。按T燥品计算，含芍药昔不得少于40. 0%,赤芍总昔为单砧昔类化合物，有 -定水溶性及醇溶性，对热光酸及碱较敏感，长时间接触，常会引起氧化，重排及聚合反 应，导致结构变化，因此在提取，分离及贮存帖类化合物时，应注意尽量避免这些因素， 水煎煮会破坏芍药昔等成分［中药化学书］。 赤芍总昔（TGP）为赤芍药材的主要活性部位。体内实验表明，赤芍总昔可使实验性脑 缺血模型小鼠的脑毛细血管通透性降低；增强断头小鼠神经细胞耐缺氧能力，显著降低脑 耗氧加 改善脑缺血再灌注小鼠被动学习记忆能力，对脑缺血再灌注小鼠脑组织LDH的减 少有一定抑制作川；抑制脑组织细胞膜质过氧化物MDA的产生，减少N0自由基的进一步 生成，并能显著提高脑组织屮超氣化物歧化酶（SOD）的活性。体外实验表明，一定浓度 的赤芍总昔对Caf, kcl和NMDA诱导的不同类型人脑皮层神经细胞钙超载损伤均有显著保 护作用。此外，赤芍总昔还具有免疫增强作用，通过重建机体免疫功能而发挥抗肿瘤作 川；对药物所致小鼠学习记忆障碍有明显的改善作川，同时对D-半乳糖衰老小鼠学习记忆 有促进作用。［实验书］我国《药品注册管理办法》规定药品注册分为9类，其中5类 为：未在国内上市销售的从植物、动物、矿物等物质小提取的令效部位及其制剂。具体的 讲5类新药即国家标准屮未收载的从植物、动物、矿物等物质屮提取的一-类或数类成分组 成的有效部位及其制剂，其有效部位含量应占提取物的50%以上。木次实验研究的赤芍总 昔制剂即为5类新药。 【赤芍药材的质量检查】按照2010版《中华人民共和国药典》一部赤芍项下的项H对 赤芍进行质量检杳。 ?性状 本品呈圆柱形，稍弯此 长5?40cm,直径0. 5?3cm。表曲棕褐色，粗糙，有纵沟及皱 纹，并有须根痕及横向凸起的皮孔，有的外皮易脱落。质硬而脆，易折断，断面粉门色或 粉红色，皮部窄，木部放射状纹理明显，有的有裂隙。气微香，味微苦、酸涩。 2?鉴别（1）木品横切血?：木栓层为数列棕色细胞。皮层薄壁细胞切向延长。韧皮部较 窄。形成层成坏。木质部射线较宽，导管群作放射状排列，导管旁有木纤维。薄壁细胞含 草酸钙簇晶，并含淀粉粒。 （2）取本品粉末0. 5g,加乙醇伽1,振摇 5分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酹2ml使溶解，作为供试品溶液。另取芍药晋对照 品，加乙醇制成每lml含2帼的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（附录VI B）试 验，吸取上述两种溶液各4*1,分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿一醋酸乙酯一甲 醇一甲酸（40:5:10:0.2）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，加 热至斑点显色清晰。供试品色谱屮，在与对照品色谱相丿应的位置上，显相同的蓝紫色斑 点O 3.含量测定 照高效液相色谱法（附录VID）测定。 色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醉-0. 05moI/L磷酸二 氢钾溶液（40： 65）为流动相；检测波长为230nmo理论板数按芍药昔峰计算应不低于 3000 o 对照品溶液的制备精密称取经五氧化二磷减压干燥器中T燥36小时的芍药昔对照品适 量,加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液,即得。 供试品溶液的制备取木品粗粉约0. 5g,精密称定，置具塞锥形瓶小，精密加入甲醇 25ml,称定重量，浸泡4小时，超声处理20分钟，放冷，再称定重量，用甲酹补足减失 的重量，摇匀，滤过，即得。 测定法分别粧密吸取对照品溶液与供试品溶液各10U1,注入液相色谱仪，测定，即得。 本品含芍药昔不得少于1.8%。 【制备工艺研究】