药物分离与纯化技术 色谱分离技术 高效液相色谱法.pptxVIP

高效液相色谱法高效液相色谱法1.高效液相色谱法2. HPLC与GC差别3. HPLC的分类和基本原理4.设备配置5.固定相6.液相色谱的流动相 高效液相色谱法高效液相色谱法(high pressure Liquid chromatography，HPLC)是利用物质在两相之间吸附或分配的微小差异达到分离的目的。当两相作相对移动时，被测物质在两相之间做反复多次的分配，这样使原来微小的差异产生了很大的分离效果，达到分离、分析和测定一些理化常数的目的。HPLC与GC差别与气相色谱比较高效液相色谱以溶剂作流动相，流动相参与分离作用，分离能力强；适用范围广，气相色谱分离分析的化合物只占化合物的30％，而高效色谱对高沸点、热不稳定、大分子量、离子型化合物等都有效，适合于生命物质的分析；分析过程中一般不破坏物质，因而可以方便地制备色谱纯物质。经典液相色谱高效液相色谱常压或减压 填料颗粒大柱效低分析速度慢色谱柱只用一次不能在线检测高压，40～50Mpa填料颗粒小，2～50μm柱效高，40000～60000块/m 分析速度快 色谱柱可重复多次使用 能在线检测HPLC与经典LC区别一、HPLC的分类和基本原理 色谱法的分离原理是：溶于流动相(mobile phase)中的各组分经过固定相时，由于与固定相(stationary phase)发生作用(吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和)的大小、强弱不同，在