血液检材中乙醇的定性及定量检验的实验流程.docx

血液检材中乙醇的定性及定量检验的实验流程 血液检材中乙醇的定性及定量检验的实验流程 1 、实验目的 依据国家标准 ?为检验交通事故案件中血液检材中是否含有乙醇成分以及其 含量的确定制定本流程。 2、 检材范围 血液检材。 3、 仪器及器材 气相色谱仪 :配有氢火焰离子化检测器和色谱数据处理机 3.2 高速离心机 : 附带离心管 移液管,2ml、1ml、0.5ml, 试管 3.5微量进样器,10卩I, 4、 检验流程 检材前处理 乙醇标准溶液的配置 准确吸取乙醇1.26mL于100mL容量瓶中?添加重蒸馏水至刻度?混匀? 得?10mg/mL乙醇储备液?再稀释10倍得1mg/mL的乙醇标准使用液。 内标物标准溶液的配置 准确吸取叔丁醇1.27mL于500mL容量瓶中?添加重蒸馏水至刻度?混匀?得 2mg/mL叔 丁醇标准液。 检材提取液的配置 取待测全血2ml于离心管内?加100微升叔丁醇内标液?约1克硫酸铵?瓶口 覆盖聚四氟乙烯薄膜?硅胶垫?用密封钳加封铝帽?混匀?置 60摄氏度水浴加热 15-20 分钟。 同时取空白血液两份?其中一份添加内标溶液 100 微升和乙醇标准使用液 20 微升?按上述方法平行操作以进行空白对照和已知对照。 4.2 定性分析 气相色谱法 进样 用10卩l微量进样器分别吸取1卩l上述各试样注入到设定好条件的气相色谱 仪中?每个试样平行进样三次。 记录及分析 分别记录各试样中内标物?乙醇标准品和可疑峰的保留时间?填入 GC定性分 析结果表中?计算它们的保留时间平均值?并以内标物的保留时间为 1?计算醇的 相对保留时间值。 定量分析 进样 用10卩l微量进样器分别吸取1卩l各试样注入到气相色谱仪中?每个试样平 行进样三次。 记录及计算 4.3.2.1 记录 记录检材及空白添加标准品中乙醇及内标物峰面积值?填入 GC定量分析记录 表中?并计算出各检材中乙醇及内标物的平均峰面积。 4.3.2.2 计算 空白检材中乙醇添加量*内标物峰面积平均值 校正因子⑴二 空白检材中内标 物进样量 *乙醇峰面积平均值 f* 检材中的乙醇峰面积值 * 内标物添加总量 *100 乙醇含量 ,mg/100mL,= 检材中 内标物峰面积值 *检材量 *1000 相对相差计算 ,X - X,*100 12 内标物回收率 ,%,= X 公式中 :XX-- 两份检材平行定量操作测定值 1 2 X -- 平均值 5、剩余检材处理 实验完成后?剩余的血液检材必须在送检人领取报告时交予送检人?并由送检 人报告领取登记表上登记签收。 6、结果与讨论 若检材与标准试样在相同的时间出峰?则表明检材中含有乙醇成分。若检材中 未出峰?而标样中出峰?则表明检材中不含乙醇成分。若检材及标样均未出峰?则 表明结果不可靠?应重新检验。 7、出具检验报告 检验完成后?由送检人在报告领取登记表上签字方可领取出具检验报告?并且 所出检验报告需留有备份?方便复查。 抚州市公安局刑警支队 理化实验室