6核酸的酶促降解和核苷酸代谢.ppt

2 ．胞苷酸的合成： 激酶 激酶 CTP 合成酶 UMP UDP UTP CTP ATP ADP ATP ADP Gln+ATP Glu+ADP+Pi 第六章 核酸的酶促降解和核苷酸代谢 本章讨论核酸酶的类别和特点，对核苷酸 的生物合成和分解代谢作一般介绍。 第一节 核酸的酶促降解 第三节 核苷酸的合成代谢 第二节 核苷酸的分解代谢 第一节 核酸的酶促降解 一、核酸酶 二、限制性内切酶 核酸酶 核苷酸酶 核苷磷酸化酶 核酸 核苷酸 核苷 碱基 + 戊糖 -1-P 磷酸 核 酸 酶 1 、核酸酶的分类 （ 1 ）根据对底物的 专一性分为 （ 2 ）根据切割位点分为 核糖核酸酶 ( RNase ) 脱氧核糖核酸酶 ( DNase ) 非特异性核酸酶 核酸内切酶 核酸外切酶 2 、核酸酶的作用特点 外切核酸酶对核酸的水解位点 5 ′ p p p p OH B p p p p 3 ′ B B B B B B B 牛脾磷酸二酯酶 （ 5 ′ 端外切 5 得 3 ） 蛇毒磷酸二酯酶 （ 3 ′ 端外切 3 得 5 ） 内切核酸酶对 RNA 的水解位点示意图 5 ′ p p p p OH Py Pu Py Py 1 ′ p p p G A C U p p p G A 3 ′ RNAase I RNAase I RNAase T 1 RNAase T 1 Pu ：嘌呤 Py ：嘧啶 限制性内切酶 ? 类型 ? 命名 ? 意义 原核生物中存在着一类能识别外源 DNA 双螺旋中 4-8 个碱基 对所组成的特异的具有二重旋转对称性的回文序列，并在此序 列的某位点水解 DNA 双螺旋链，产生粘性末端或平末端，这类 酶称为限制性内切酶（ ristriction endonuclease ）。 常用的 DNA 限制性内切酶的专一性 酶 辨认的序列和切口 说明 ‥ ‥ A G C T ‥‥ ‥ ‥ T C G A ‥ ‥ ‥ ‥ G G A T C C ‥‥ ‥ ‥ C C T A G G ‥‥ ‥ ‥ A G A T C T ‥‥ ‥ ‥ T C T A G A ‥‥ ‥ ‥ G A A T T C ‥‥ ‥ ‥ C T T A A G ‥‥ ‥ ‥ A A G C T T ‥‥ ‥ ‥ T T C G A A ‥‥ ‥ ‥ G T C G A C ‥‥ ‥ ‥ C A G C T G ‥‥ ‥ ‥ C C C G G G ‥‥ ‥ ‥ G G G C C C ‥‥ Bam H I Alu I Bgl I Eco R I Hind Ⅲ Sal I Sma I 四核苷酸，平端切口 六核苷酸，平端切口 六核苷酸，粘端切口 六核苷酸，粘端切口 六核苷酸，粘端切口 六核苷酸，粘端切口 六核苷酸，粘端切口 限制性内切酶类型 I 型：分子量大于 10 5 ，多亚基，需 S- 线苷蛋氨酸、 ATP 和 Mg 2+ ，识别位点与切割位点相差甚远，产物为异质，是限 制与修饰相排斥的多功能酶 . Ⅱ 型：分子量小于 10 5 ，需 Mg 2+ ，切割位点位于识别 位点上，产物为专一性片段，不具修饰酶功能。现在分子生 物学研究所用的限制性内切酶均为此类。 ⅡI 型：识别位点为 5-7bp 的非对称序列 ，切割位点在 顺序之外离识别 序列 5-10bp ，切割双链，个别也切割单链。 是限制与