微生物发酵技术 任务一 培养基的营养成分 培养基的营养成分.pptVIP

* * * 六、前体 在微生物代谢产物的生物合成过程中，有些化合物能直接被微生物利用构成产物分子结构的一部分，化合物本身的结构没有大的变化，这些物质称为前体。前体最早是从青霉素发酵生产中发现的。在青霉素发酵时，人们发现添加玉米浆后，青霉素单位可从20μg/Lml增加到l00μg/ml。进一步研究表明，发酵单位增加的主要原因是玉米浆中含有苯乙酰胺，它能被优先结合到青霉素分子中，从而提高了青霉素G的产量。 * 前体必须通过产生菌的生物合成过程，才能掺入到产物的分子结构中。在一定条件下，前体可以起到控制菌体代谢产物的合成方向和增加产量的作用。例如在青霉素发酵中加入苯乙酸或苯乙酰胺可以提高青霉素G的产量，而且使青霉素G的比例提高到99%，若不加入前体，青霉素G只占青霉素总量的20%～30%。 根据前体的来源，可将前体分为外源性前体和内源性前体。外源性前体(exogc—DOHS precursor)是指产生菌不能合成或合成量极少，必须由外源添加到培养基中供给其合成代谢产物，如青霉素G的前体苯乙酸、青霉素V的前体苯氧乙酸。内源性前体(endogenous precursor)是指产生菌在细胞内能自身合成的、用来合成代谢产物的物质，如头孢菌素C生物合成中的α-氨基己二酸、半胱氨酸和缬氨酸是内源性前体。表3—1为一些发酵产物的前体。外源性前体是发酵培养基的组成成分之一。需要注意的是：有此外源性前体物质，如苯乙酸、丙酸等浓度过高会对菌体产生毒性，此外，有些产生菌能氧化分解前体，因此在生产中为了减少毒性和提高前体的利用率，补加前体宜采用少量多次的间歇补加方式或连续流加的方式。 * 前体必须通过产生菌的生物合成过程，才能掺入到产物的分子结构中。在一定条件下，前体可以起到控制菌体代谢产物的合成方向和增加产量的作用。例如在青霉素发酵中加入苯乙酸或苯乙酰胺可以提高青霉素G的产量，而且使青霉素G的比例提高到99%，若不加入前体，青霉素G只占青霉素总量的20%～30%。 根据前体的来源，可将前体分为外源性前体和内源性前体。外源性前体(exogc—DOHS precursor)是指产生菌不能合成或合成量极少，必须由外源添加到培养基中供给其合成代谢产物，如青霉素G的前体苯乙酸、青霉素V的前体苯氧乙酸。内源性前体(endogenous precursor)是指产生菌在细胞内能自身合成的、用来合成代谢产物的物质，如头孢菌素C生物合成中的α-氨基己二酸、半胱氨酸和缬氨酸是内源性前体。表3—1为一些发酵产物的前体。外源性前体是发酵培养基的组成成分之一。需要注意的是：有此外源性前体物质，如苯乙酸、丙酸等浓度过高会对菌体产生毒性，此外，有些产生菌能氧化分解前体，因此在生产中为了减少毒性和提高前体的利用率，补加前体宜采用少量多次的间歇补加方式或连续流加的方式。 主要功能是构成菌体成分、作为酶的组成部分、酶的激活剂或抑制剂、调节培养基渗透压、调节pH值等。 一般微生物所需要的无机盐为硫酸盐、磷酸盐、氯化物和含钾、钠、镁、铁的化合物。还需要一些微量元素，如铜、锰、锌、钼等。 4.无机盐 （1）磷酸盐 组成细胞的矿质元素中磷的含量最高 磷是合成核酸、磷酸、一些重要的辅酶NAD、NADP、CoA等以及高能磷酸化合物（ADP、ATP）的重要原料。 磷还有利于糖代谢的进行，因此对微生物的生长有明显的促进作用。 磷酸盐还是磷酸缓冲液的组成成分，对环境中的pH起着重要的调节作用。 配置培养基时，必须加入一定量的磷酸盐. 但是过量的磷常会抑制许多产物的合成。例如，谷氨酸发酵生产中，磷含量对谷氨酸发酵影响很大。磷浓度过高时，菌体生长旺盛，但是会抑制6-磷酸葡萄糖脱氢酶的活性，菌体转向合成缬氨酸，谷氨酸产量降低；但磷含量过低，菌体生产不好。 但也有一些产物的生产需要较高浓度的磷酸盐。 （2）硫酸镁 镁 除叶绿素，不参与细胞的组成。 酶激活剂，影响基质氧化与蛋白质合成。 常以硫酸镁加入，碱性溶液中会生成氢氧化镁沉淀，配料时要注意。 硫 硫是含硫氨基酸的成分和某些辅酶的活性基，如辅酶 A、硫辛酸和谷胱甘肽等。 在某些产物中硫是组成元素。如青霉素分子含硫元素，在其生产培养基中，需要加入硫酸钠或硫代硫酸钠等含硫化合物作硫源。 （3）铁 是细胞色素、细胞色素氧化酶和过氧化氢酶的成分，是菌体有氧氧化必不可少的元素。 铁制发酵罐内的溶液即使不加任何含铁化合物，其铁离子浓度已达30 ug/ml。 一些天然培养基的原料中也含有铁，所以在一般发酵培养基中不再加入含铁化合物。 铁：有些产品对铁很敏感： 例1：青霉素要求最适铁含量在20 ug/ml以下。 例2：柠檬酸生产中，无铁培养基中产酸率可比含铁培养基提高近3倍。 例3：生产啤酒时，糖化用