试验三蛋白质等电点测定.ppt

实验三 蛋白质等电点测定 ? 一、原理 蛋白质是一种两性电解质。在 溶液中存在下列 平衡 。其解 离状态和程度爱溶液的 pH 值 影响。当溶液的 pH 达到一定 数值时，会导致蛋白质颗粒 上正负电荷的数目相等，此 时，蛋白质不移动，此时溶 液的 pH 值称为该蛋白质的等 电点。等电点时，其溶解度 最小。 ? 二、操作 1. 取 4 支洁净的试管，按 表 顺 序分别精确加入各试剂，然 后混匀。 2. 向上述试管中各加入酪蛋白 的醋酸钠溶液 1ml ，随加随摇。 观察其混浊度。静置 10 分钟 后，再观察其混浊度。混浊 度以‘＋的多少来表示。 沉淀最多的一管即为酪蛋白 的等电点。判断其等电点。 实验四 蛋白质的沉淀反应 ? 一、原理 在水溶液中的蛋白质分子由于表面生成水化层和双电层而成 为稳定的亲水胶体颗粒，具有胶体的所有性质。在一定的理化 因素影响下，蛋白质颗粒可因推动电荷和脱水而沉淀。 1. 可逆沉淀反应 蛋白质分子的结构没有发生变化，仅因为表面的水化层和双 电层遭到破坏而沉淀。如蛋白质的盐析作用和低温下乙醇的沉 淀作用。除去影响因素，蛋白质又可恢复天然性质。 2. 不可逆沉淀反应 影响因素除了破坏蛋白质的两外层之外，还使其内部结构发 生了改变，这种沉淀在除