试验一：细胞质流动_.ppt

细胞生物学实验 2008 生物科学 5 班 细胞生物学实验 实 验 室 守 则 1 、 不迟到，不早退，更不能无故缺课； 2 、进实验室要 穿白大褂 。实验室内 禁止喧哗 。 3 、实验前必须认真 预习 ，熟悉实验的内容。 4 、实验中应 严格按操作规程进行 ，认真操 作、仔细观察，及时记录实验现象及结果； 5 、 在实验的过程中制造的任何垃圾都要丢到垃 圾筐里（或先放在自己的桌面废物缸内）， 严 禁随地投弃！ 细胞生物学实验 实 验 室 守 则 6 、实验器具应 保持清洁 ， 用过的玻璃器皿必须 洗净后放回原处。实验台面应保持整洁，仪器、 药品摆放整齐。 公用试剂及用具盒用完后，应 立即盖好放回原处。 7 、 执行 值日生制度 ，每天安排 3-4 人值日，其职 责是负责实验器具的整理、操作台、水槽、地 板等实验室卫生工作。 8 、 保证安全 9 、 实验结束后 认真分析和总结 ， 实事求是、独 立地完成 实验报告 细胞生物学实验 实验报告格式 ? 班级、姓名、学号、日期 ? 实验项目 ? 实验目的 ? 实验原理 ? 实验器材 ( 实验材料 , 实验试剂 , 实验仪器 ) ? 实验步骤 ? 实验结果 （重点） ? 分析和讨论 （重点） ? 参考文献 实验一 、细胞质流动及其影响因素 实验二 、叶绿体的分离与荧光观察 实验三 、线粒体的制备与活性鉴定 实验四 、 细胞膜的渗透性与植物液泡系的观察 实验五 、细胞的凝集反应与细胞融合 实验六 、动植物细胞骨架的观察 实验七 、细胞吞噬作用和细胞中过氧化物酶的显示 实验八 、电子显微镜演示 细胞生物学实验安排 第 2-9 周 36 学时 实验一 细胞质流动及其影响因素 细胞生物学实验 细胞生物学实验 ? 观察植物细胞质流动现象 ? 了解影响细胞质流动的因素 实验目的 细胞生物学实验 实验原理 ? 在多种植物的细胞中都能观察到植物 细 胞质流动 现象，它是 细胞活动强弱的重 要指标 。 ? 细胞质流动现象的产生，是细胞骨架中 微丝肌动蛋白与肌球蛋白相互滑动的结 果。 ? 细胞质流动要消耗能量，受各种因素诸 如温度、渗透压及各种离子的影响。 细胞生物学实验 引起细胞质流动的因素 ? 内因 ? 微丝束（肌动蛋白纤维）、肌球蛋白、 ATP ? 外因 ? 物理：温度、光、机械刺激 ? 化学： pH 、电解质、非电解质、渗透压、 呼吸抑制剂 细胞生物学实验 细胞质流动的主要形式 ? 细胞质环流： 在液泡发达的植物 ( 如黑藻、 轮藻、伊乐藻 ) 细 胞中，细胞质成薄层沿着细胞膜以一定的速度和方向循环流动。 这种不断地循环流动称为细胞质环流。 ? 穿梭流动： 穿梭流动是细胞质流动的另一种形式，它与环流 不同，是向相反方向来回穿梭。由于流动方向在一定时间内来回 交换，因此叫穿梭流动。 ? 布朗运动： 在活细胞中可以看到细胞质内的许多小颗粒在无 规则地跳动着，这在暗视野显微镜下观察更为明显，叫做布朗运 动。布朗运动的产生除了与微丝的存在有关外，还与微梁网格的 收缩有关。 细胞生物学实验 实验材料试剂仪器 ? 实验材料 ：紫鸭趾草花丝，黑藻（水王 荪、轮叶黑藻）叶。 细胞生物学实验 实验材料试剂仪器 ? 实验试剂： ? 0.17 mol/L, 0.35 mol/L, 1 mol/L 氯化钠 ? 0.17 mol/L ， 0.35 mol/L , 1 mol/L 丙二酸钠 ? 1 mmol/L 2,4 ﹣二硝基酚 (dinitrophenol, DNP ） ? 1 mol/L 甘露醇 ? 实验仪器：显微镜，载玻片，盖玻片，尖头镊 子，刀片 , 吸水纸等 细胞生物学实验 丙二酸钠 ? 结构简式： NaooC-CH 2 -COONa ? 丙二酸在结构上与琥珀酸（丁二酸）相似，可 与琥珀酸竞争和琥珀酸脱氢酶的活性中心结合。 ? 若琥珀酸脱氢酶与丙二酸等结合，则不能再与 琥珀酸结合而使之脱氢，产生抑制作用，且抑 制程度取决于琥珀酸与抑制剂在反应体系中浓 度的相对比例，所以这种抑制是 竞争性抑制 。 细胞生物学实验 乙酰 CoA 三羧酸 循环 电子传递 （氧化） 磷酸化 脂肪 多糖 蛋白质 脂肪酸、甘油 葡萄糖、 其它单糖 氨基酸 大分子降解成基本结构单位 小分子化合物分解成共同 的中间产物（如丙酮酸、 乙酰 CoA 等 共同中间产物进入三羧酸循 环 , 氧化脱下的氢由电子传递 链传递生成 H 2 O ，释放出大 量能量，其中一部分通过磷 酸化储存在 ATP 中。 +Pi 生物氧化的三个阶段 细胞生物学实验 三羧酸循环 细胞生物学实验 2,4- 二硝基酚（ DNP ） ? 结构式 ? DNP 是氧化磷酸化的 解偶联剂 ，解偶联剂使氧化和磷 酸化脱偶联， 氧化仍可以进行，而磷酸化不能进行 ， 解偶联剂作用的本