原位杂交步骤自己整理的精讲.docxVIP

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2021-03-11 发布于天津
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原位杂交步骤自己整理的精讲.docx

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荧光原位杂交试剂及其配制方法以下试剂均需用水配制溶于处理的去离子水中用计测其再用调其为加吐温配需要配好后加入千分之一的放置高温灭菌多聚甲醛准确称取多聚甲醛溶于的中避光于摇床上待其全部溶解后用棕色瓶分装成小体积包装保存于注本方法与其他一些文献用和先后调节而促其溶解的方法略有不同因是考虑到的稳定性另外之所以采用上述方法使多聚甲醛缓慢溶解而没有采用文献中提及的用调节其至促其溶解后再用调节的原因除了用一般的试纸测量配置好的多聚甲醛的不够准确外也因为不能用计对其酸碱度进行测量因为它会损坏计取以上各成分溶于

荧光原位杂交试剂及其配制方法（以下试剂均需用 RNase-free水配制）： 1×PBS：NaCl 8g∕ L、KCl 0.2 g∕ L、Na2HPO4 1.44 g∕L、 KH2PO4 0.24 g∕L，溶于 DEPC 处理的去离子水中，用 pH 计测其 pH，再用 NaOH 调其 pH 为 7.4； PBST：PBS加 0.1%吐温 -20； LiCI：配 4M LiCI 100ml 需要 LiCI． H20 25.6g，配好后加入千分之一的 DEPC，37℃， 12h 放置，高温灭菌。 4%多聚甲醛（ 4%PFA）：准确称取 40g 多聚甲醛，溶于 1000ml 的 1×PBS中，