2、蛋白质的显色反应.pdfVIP

实验二 蛋白质得显色反应 一、实验目得 1、了解构成蛋白质得基本结构单位及主要连接形式． 2 、了解蛋白质与某些氨基酸得呈色反应原理。 3 、学习几种常用得鉴定蛋白质与氨基酸得方法。 二、呈色反应 1、双缩脲反应 （1) 原理 : o 2+ 尿素加热至１８ 0 C 左右 , 生成双缩脲并放出一分子氨。双缩脲在碱性条件下能与Ｃ u 结合生成 紫红色化合物， 此反应称为双缩脲反应。 蛋白质分子中有肽键， 其结构与双缩脲相似 , 也能发生此反 应 ( 二肽与氨基酸都不能发生双缩脲反应 ）。可用于蛋白质得定性或定量测定。 反应式如下 : NH 2 NH 2 NH O- H H O C 2 O 2 ˉ ２ 双缩脲反应不仅为含有 两个以上肽键 得物质所有 , 含有一个肽键与一个O -CS-NH , —Ｃ C C O C N N C NH 2 2+ o Ｈ2 — NＨ2, -C ＨＲ-NH2 ， -CCuＨ2 —Ｎ H2- ＣH-ＮH2 －CＨ2-OH 或—ＣＨ OHＣH２ＮH2 等基团得物质以及乙 180 C .. NH NH Cu NH NH 3 NH 2+ + + 3 ３ ３ ４ 二酰二胺等物质也有此反应。 NH 也干扰此反应 , 因为 NＨ 与 Cu 可生成 暗蓝色得络离子Ｃ u( ＮH ) OH .. N C C O C N NH 2 ２+ 。因此 , 一切蛋白质或二肽以上得多肽都有双缩脲反应 , 但有双缩脲反应得物质不一定都就是蛋白 NH - 2 O H H O O C C O