血清谷丙转氨酶测定.pptVIP

* * * * * 血清谷丙转氨酶活性测定 ——比色分析法 实 验 提 纲 实验目的 1 酶活性测定原理与方法 2 比色分析法原理与公式计算 3 722分光光度计操作方法与注意事项 4 思考题 5 1 实验目的 1 2 3 4 掌握血清谷丙转氨酶活性测定的原理 熟悉血清谷丙转氨酶活性测定的方法 熟悉比色分析法 了解722分光光度计的使用方法 2 酶活性测定原理与方法 酶活性测定原理 ＋ 2,4－二硝基苯肼 (黄色) 丙酮酸二硝基苯腙 (红棕色) NaOH α-酮戊二酸 丙氨酸 谷氨酸 丙酮酸 ＋ GPT 丙酮酸 酶活性测定方法 2 酶活性测定原理与方法 1 试管号 标准管 标准 空白管 测定管 测定 空白管 丙酮酸标准液（ml） (1ml=100μg) 0.1 － － － 新鲜血清（ml） － － 0.1 0.1 底物液（37℃）（ml） 0.5 0.5 0.5 － 0.1mol/L磷酸盐缓冲液（ml）(pH=7.4) － 0.1 － － 此前三管置于37℃保温30分钟 2，4-二硝基苯肼(ml） 0.5 0.5 0.5 0.5 底物液（ml） － － － 0.5 充分混合，置于37℃保温20分钟 0.4mol/L NaOH（ml） 5 5 5 5 2 3