生物氧化与氧化磷酸化.pptVIP

2021/3/14 * 代谢物在生物氧化过程中释放出的自由能用于合成ATP（即ADP + Pi → ATP）,这种氧化放能和ATP生成（磷酸化）相偶联的过程称氧化磷酸化（oxidative phosphorylation）,它是需氧生物合成ATP的主要途径。有两种方式。 底物水平磷酸化（substrate level phosphorlation） 当底物发生脱氢或脱水时,分子内部能量重新分布而形成高能磷酸键（或高能硫酯键）,然后高能键把能量转移给ADP（或GDP）生成ATP（或GTP）的过程,称为底物水平磷酸化作用。 一、概念 2021/3/14 * 电子传递水平磷酸化(Electron transport level phosphorylation) 指代谢底物在生物氧化中脱掉的氢,经呼吸链传递给氧,化合成水的过程中释放的能量（放能）与ADP磷酸化生成ATP（吸能）相偶联的过程。 磷酸化 氧化 偶联 2021/3/14 * 偶联部位 ETC中,电子在传递体之间转移时释放的能量如可满足ADP→ATP的需要时,即视为氧化磷酸化的偶联部位(coupled site)或氧化磷酸化位点。根据热力学测定,当电子从NADH经呼吸链传递到氧时,有三处可以产生ATP:NADH和CoQ之间、Cytb和Cytc之间、Cytaa3和O2之间。 　　呼吸过程中无机磷酸（Pi）消耗量和分子氧（O2）消耗量的比值称为磷氧比。P/O的数值相当于一对电子经呼吸链传递至分子氧所产生的ATP分子数。 到目前为止,电子传递链中一分子NADH或FADH2被氧化所泵出的质子数,以及ATP合酶合成一个ATP所需的质子数仍然都是未知,对此,已有很多实验试图计算这两个值,但仍未取得一致意见。 对于电子传递链,目前最公认的结论是一个NADH被氧化泵出10个质子,一个FADH2被氧化泵出6个。而合成一分子ATP大约需要4个质子内流。因此,对于NADH,P/O值约为2.5,而FADH2的P/O值约为1.5。 磷氧比（ P/O ） NADH FADH2 O2 1 2 H2O H2O NADH呼吸链: P/O ≌ 3 ADP+Pi ATP FADH2呼吸链: P/O ≌ 2 O2 1 2 2e- 2e- ADP+Pi ATP ADP+Pi ATP ADP+Pi ATP ADP+Pi ATP 然而也有的教科书认为P/O值分别为3和2。 2021/3/14 * 定义式：能荷= ————————— [ATP]+0.5[ADP] [ATP]+[ADP]+[AMP] 意义: 能荷由ATP 、 ADP和AMP的相对数量决定,数值在0~1之间,反映细胞能量水平。 能荷对代谢的调节可通过ATP、 ADP和AMP作为代谢中某些酶分子的别构效应物进行变构调节来实现。 能荷 相对速率 ATP的利用途径 ATP的生成途径 能荷对ATP的生成途径和ATP的利用途径相对速率的 影响 能荷 2021/3/14 * 三、氧化磷酸化偶联机制 关于氧化和磷酸化的偶联,曾提出了三种假说: 化学偶联假说（chemical coupling hypothesis） 化学渗透假说(chemiosmotic theory)。 构象变化假说(conformational coupling hypothesis) 化学偶联假说是爱德华?斯莱特（Edward C. Slater）于1953年提出。认为在电子传递过程中生成高能中间物,再由高能中间物裂解释放的能量驱动ATP的合成。这一假说可以解释底物磷酸化,但在电子传递体系的磷酸化中尚未找到高能中间物。 2021/3/14 * 化学渗透假说 chemiosmotic hypothesis 1961年由英国生物化学家Peter Mitchell最先提出。 认为:电子传递释放的自由能和ATP的合成是与一种跨线粒体内膜的质子梯度相偶联的。即电子传递释放的自由能驱动H+从线粒体基质跨过内膜进入膜间隙,从而形成跨线粒体内膜的H+离子梯度,及一个电位梯度。这个跨膜的电化学电势驱动ATP的合成。 2021/3/14 * NADH呼吸链中的三个复合物Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ起着质子泵的作用,将H+ 从线粒体基质跨过内膜泵入膜间隙。 H+不断从内膜内侧泵至内膜外侧,而又不能自由返回内膜内侧,从而在内膜两侧建立起质子浓度梯度和电位梯度即电化学梯度,也称为质子动力。 当存在足够的跨膜电化学梯度时,强大的质子流通过嵌在线粒体内膜的F0F1-ATP合酶返回基质,质子电化学梯度蕴藏的自由能释放,推动ATP的合成。 获得1978年的诺贝尔