蛋白质生物合成—翻译及翻译后过程.pptVIP

2021/3/23 * 蛋白质的正向和逆向运输 正向 逆向 2021/3/23 * 又称注册(registration) （一）进位 指根据mRNA下一组遗传密码指导,使相应氨基酰-tRNA进入核蛋白体A位。 2021/3/23 * 延长因子EF-T催化进位（原核生物） 2021/3/23 * （二）成肽 转肽酶(transpeptidase)催化形成肽键 2021/3/23 * （三）转位（Translocation） 延长因子EF-G有转位酶活性,结合并水解GTP,使核蛋白体向mRNA的3侧移动 2021/3/23 * 进位 转位 成肽 2021/3/23 * 三、肽链合成终止 （Termination） 终止密码的辨认及肽链从肽酰-tRNA水解出。 mRNA从核蛋白体中分离及大小亚基的拆开 终止过程需释放因子(RF）。 2021/3/23 * 释放因子(release factor, RF):与肽链合成终止相关的蛋白因子 识别终止密码,如RF-1特异识别UAA、UAG;而RF-2可识别UAA、UGA 诱导转肽酶改变为酯酶活性,催化肽酰基转移到-OH上,使肽链从核蛋白体上释放。 原核生物释放因子:RF-1,RF-2,RF-3 真核生物释放因子:eRF 2021/3/23 * 四、核蛋白体循环— 多聚核蛋白体 (polysome) 细胞内一条mRNA链上结合着多个核糖体 每个核糖体都独立完成一条多肽链的合成 蛋白质合成高速、高效进行 2021/3/23 * 蛋白质生物合成的调节 阅读框架的漂移、重叠和5’-AUG的作用 翻译错误:氨基酰合成酶校正 RNA的结构:帽子、poly (A)尾、空间结构 蛋白质生物合成阻断剂: 抗生素类—大环内酯类、氯霉素、氨基糖苷类、四环素 抗代谢药物—抗肿瘤药 其他生物活性物质—白喉毒素、干扰素 2021/3/23 * 氨基糖苷类抗生素 放线菌酮 氯霉素 四环素族 嘌呤霉素 2021/3/23 * 2021/3/23 * 干扰素的作用机理 干扰素诱导的蛋白激酶 dsRNA 1. 干扰素诱导eIF2磷酸化而失活 ATP eIF2 ADP eIF2-P（失活） Pi 磷酸酶 2021/3/23 * 2. 干扰素诱导病毒RNA降解 降解mRNA dsRNA 干扰素 A A P A P PPP 2? 5? 2? 5? 5? 2?- 5?A A PPP ATP 2-5A合成酶 RNaseL RNaseL 活化 2021/3/23 * 蛋白质合成后的折叠 折叠(folding):蛋白质可凭借相互作用在细胞环境（特定的酸碱度、温度等）下,进行自我组装 蛋白质自发获得成熟的构型——自我装配 需要辅助蛋白协助——分子伴侣 2021/3/23 * 分子伴侣（molecular chaperones） 一类在序列上没有相关性但有共同功能的蛋白质。在细胞内帮助其他含多肽的结构完成正确的组装,且在组装完毕后与之分离,不构成这些蛋白质结构执行功能时的组份 作用 蛋白合成开始时,防止新生肽链在未完成折叠之前相互聚合,帮助蛋白质获得最初的正确结构 封闭所暴露出来的疏水区段,为蛋白质折叠创造无干扰的隔离环境 识别错误折叠的变性新蛋白,帮助复性或使其降解 2021/3/23 * 应激蛋白70家族（heat-shock protein 70）:参与蛋白质的从头折叠、跨膜运输、错误折叠多肽的降解及其调控过程 伴侣素系统（chaperonin system）:具有独特的双层环状结构的寡聚蛋白,以依赖ATP的方式为非自发性折叠蛋白质提供能折叠形成天然空间构象的微环境 分子伴侣的分类及作用 2021/3/23 * 翻译后的加工修饰 新和成的多肽只有经过细胞内各种修饰处理后才能成为有活性的成熟蛋白质——翻译后加工 蛋白质氨基酸侧链的微小改变 特定氨基酸残基上添加体积较大的基团 剪切 — 从新生肽链上去除不等的氨基酸残基 2021/3/23 * 常见的加工修饰方式 （一）侧链氨基酸的微小修饰: 二硫键的形成和正确配对—蛋白质合成后通过两个半胱氨酸的氧化作用生成 甲基化、糖基化、磷酸化及乙酰化等化学修饰 2021/3/23 * （二）剪切和剪接加工 新生肽链N端fMet或Met的切除 剪切— 直接从新生肽链上除去不等的氨基酸残基 分泌型蛋白的信号肽的切除 前体蛋白加工:切除前体蛋白的一端肽段;去除蛋白内含子 活性肽的剪切释放:一条已合成的多肽链经翻译加工后生成不同活性的蛋白质或多肽 剪接— 蛋白质前体通过多肽剪除某些氨基酸片段,再以一定的顺序结合起来生成成熟有活性的蛋白质 2021/3/23 * N C 信号肽 PMOC KR KR 103肽 ( ？) ACTH ?-LT ?-MSH ?-MSH